細胞粘附分子ELISA檢測試劑盒是一種用于檢測細胞表面粘附分子水平的實驗工具。其原理主要包括以下幾個步驟:
樣本處理:將待測樣本(如細胞上清液、組織提取物等)加入已經涂有特定抗體的微孔板中,,使樣本中的目標分子與固相抗體發(fā)生特異性結合。
洗滌:洗去未結合的雜質和非特異性結合物,以保證后續(xù)步驟的準確性,。
二級抗體結合:添加與待測目標分子不同表位上標記有酶(如辣根過氧化物酶-HRP)的次級抗體。該次級抗體可以識別并結合到待測目標分子上,。
再次洗滌:洗去未結合的二級抗體,。
底物反應:向孔內加入適當底物,使酶催化產生可量化信號,。通常使用底物TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)來生成一個可見的藍色產物,。
反應停止:通過添加停止溶液(如硫酸或鹽酸)停止底物反應,產生的藍色產物轉變?yōu)辄S色,。
讀取結果:使用酶標儀檢測光密度值(OD值),,其與待測樣本中目標分子的含量呈正相關關系。通常將待測樣本的OD值與標準曲線進行比較,,從而確定目標分子的濃度,。
細胞粘附分子ELISA檢測試劑盒通過這一原理,可以快速,、準確地定量分析細胞表面粘附分子的水平,,并在許多實驗和研究領域中得到廣泛應用,如腫瘤學,、免疫學,、神經科學等。