我們建議在臨床ELISA試劑盒測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應時間的條件,。將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,,需要一定的時間,,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,,而在臨床實驗室中,,ELISA試劑盒很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,,弱陽性樣本測不出來的問題。
曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,,ELISA試劑盒在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,ELISA試劑盒測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應的1ng/ml弱陽性樣本時,,總是測不出來,,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關,此時微孔板轉入溫箱后37℃溫育時間不夠,,以致弱陽性樣本測定為陰性,。
因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37℃,,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。用一小溫度計放置板孔反應溶液中測量觀察即可,。ELISA試劑盒作為一種固相免疫測定,,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合,,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間,。