因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物(見3.6),。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí)，更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo),。目視法簡(jiǎn)捷明了,，但頗具主觀性。在條件許可下,，應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,，這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,，S),、陽性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N)的吸光值,，然后進(jìn)行計(jì)算,。計(jì)算方法有多種,，大致可分為陽性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類。a．陽性判定值陽性判定值(cut-offvalue)一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),，以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標(biāo)準(zhǔn),。  

用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定，陽性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,，須配用精密的儀器,，并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對(duì)大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)而得到的?，F(xiàn)舉某種檢測(cè)HBsAg的試劑盒為例,。試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml.每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照,。測(cè)得A值后,，先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX)，兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個(gè)特定的數(shù)值(例0.400),，試驗(yàn)才有效,。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX,，如其中之一超出此范圍,，則棄去，而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX,；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上范圍,，則該次實(shí)驗(yàn)無效。陽性判定值按下式計(jì)算：陽性判定值=NCX+0.05標(biāo)本A值＞陽性判定值的為陽性,，小于陽性判定值的為陰性,。  

應(yīng)注意的是，式中0.05為該試劑盒的常數(shù),，只適合于該特定條件下,，而不是對(duì)各種試劑均可通用。更應(yīng)注意的是,，N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清,。有的試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多,。因此,，這類試劑盒規(guī)，如N<0.05(或其他數(shù)值),，則按0.05計(jì)算,，否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。