酶聯(lián)診斷試劑常用的兩大洗滌方式介紹
酶聯(lián)診斷試劑是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用較廣的技術(shù),。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,，用洗滌法將液相中的游離成分洗除,。常用的 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測(cè)大分子抗原,，后者用于測(cè)定特異抗體,。
酶聯(lián)診斷試劑具有快速、敏感,、簡(jiǎn)便,、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，使其得到迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用 ,。盡管早期的試劑盒由于特異性不夠高而妨礙了其在實(shí)際中應(yīng)用的步伐,，但隨著方法的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新,，尤其是采用基因工程方法制備包被抗原,，采用針對(duì)某一抗原表位的單克隆抗體進(jìn)行阻斷酶聯(lián)診斷試劑試驗(yàn)，都大大提高了酶聯(lián)診斷試劑的特異性,，加之電腦化程度*的檢測(cè)儀的使用,，使酶聯(lián)診斷試劑更為簡(jiǎn)便實(shí)用和標(biāo)準(zhǔn)化，從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測(cè)方法之一,。
酶聯(lián)診斷試劑靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。對(duì)于酶聯(lián)診斷試劑的洗滌主要有兩大方法,，那今天酶聯(lián)診斷試劑廠家就給大家簡(jiǎn)單講解下哦。
一,、浸泡式
1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液,；
2.用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去),；
3.浸泡,，即將洗滌液注滿板孔,，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng),，浸泡時(shí)間不可隨意縮短,；
4.吸干孔內(nèi)液體，吸干應(yīng)*,，可用水泵或真空泵抽吸,，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；
5.重復(fù)操作c和d,，洗滌3-4次(或按說(shuō)明規(guī)定),。在間接法中如本底較高，可增加酶聯(lián)診斷試劑洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間,。
二,、流水沖洗式
開(kāi)始用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水,。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗 2分鐘后,，吸干液體,，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可,。浸泡式猶如盆浴,，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*,，且也簡(jiǎn)便,、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明,，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌,。酶聯(lián)診斷試劑洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面,，洗滌效果更佳,。
