延長色譜柱使用壽命的方法

時間：2009-10-14閱讀：2982

        色譜柱的使用壽命，除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關(guān)系外,，zui主要的是與日常的委會密切相關(guān),。為延長色譜柱的使用壽命,，維護(hù)您的利益,，請仔細(xì)閱讀此部分,。
        色譜柱的使用壽命主要是分局柱效和柱壓兩個指標(biāo)來衡量，如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高,，通常被認(rèn)為該色譜柱已經(jīng)結(jié)束,。因此，延長色譜柱使用壽命的關(guān)鍵是,，消除引起柱效下降和柱壓升高的因素,。以下是色譜柱的日常維護(hù)方法：
一、流動相的PH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)
         Welch公司的色譜柱除反相氰基柱PH1.5-9.0外,，其反相色譜柱的PH范圍均為1.5-10,，由于填料中存在Si-C和Si-O鍵，流動相超過其PH范圍將會導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,，使柱效下降,，使用壽命變短,。由于流動相的PH 控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害,，通常很難是色譜柱恢復(fù),，因此必須認(rèn)真對待，嚴(yán)格控制流動相的PH值,。
二,、去除樣品和流動相中的固體顆粒
        樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高,，而且也會引起柱效下降,，因為篩板的堵塞會引起液流不均，導(dǎo)致色譜峰型拖尾,、變寬,，從而使柱效下降。因此,，建議使用超純水和色譜純試劑,，在分析樣品前對樣品進(jìn)行針筒過濾，流動相過0.45μm濾膜,。
三,、使用保護(hù)柱或在線過濾器
        樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì)，因為泵的磨損,、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì),，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱，堵塞篩板,，導(dǎo)致柱壓升高,、柱效下降。保護(hù)柱和在線過濾器上都有篩板,，其孔徑與色譜柱孔徑相同,，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,，因此，除對樣品和流動相進(jìn)行過濾外,，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器,。
        如果去人色譜柱柱壓升高是由于進(jìn)樣端篩板被堵引起的，科選擇一下方式進(jìn)行補(bǔ)救：
        1,、先在色譜柱前加上保護(hù)柱或在線過濾器,，然后用甲醇、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min,。
      2,、先在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過濾器，然后反向使用,。
四,、正確使用緩沖鹽
        緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機(jī)溶劑，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會使其析出,，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結(jié)，柱壓上升,；同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降，柱效降低,。緩沖鹽析出后,，去除非常困難，因此,，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要,。
         正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過濾,，使用后要沖洗,。具體方法如下：
        1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,；使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗色譜柱過夜,。
        2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過程中緩沖鹽析出,。
        注意：過渡流動相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動相相同，區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽,。
        3,、緩沖鹽析出的補(bǔ)救方法：
         1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
         2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。
五,、防止強(qiáng)保留物質(zhì)在色譜柱上存留
         強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積,，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰型變寬,、拖尾,，使柱效下降，同時也會引起保留時間的變化,，累積到一定程度時還會導(dǎo)致柱壓升高,。由于強(qiáng)保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應(yīng)，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來，但對許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言,，很難判斷其是否是含有強(qiáng)保留物質(zhì),，因此要防止強(qiáng)保留物質(zhì)的累積，需要在每天的日常維護(hù)中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱,。
清洗方法：
        1、未使用緩沖鹽：每天分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后再用甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min。
        2,、使用過緩沖鹽：分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽，然后在用純甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min
        3,、補(bǔ)救方法：
水——乙氰——氯仿（或異丙醇）——乙氰——水
每一步以1.0ml/min流速反向沖洗色譜柱60min,。

許昌瑞泰豐科技有限公司

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