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當(dāng)前位置:天津市金貝爾科技有限公司>>技術(shù)文章>>色譜柱正向使用反向沖洗優(yōu)勢(shì)和原理
先說(shuō)說(shuō)柱子能不能反沖的問(wèn)題,,色譜柱到底能不能反沖?如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會(huì)有什么問(wèn)題的,,從填料流失的角度來(lái)說(shuō),,粒徑為5um,而篩板孔徑為2um,,這種情況下正沖反沖都不會(huì)造成填料的流失,;此外,從柱子裝填的角度來(lái)說(shuō),,裝柱時(shí)是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的,,與反沖時(shí)的液體流路方向相同,,裝柱時(shí)那么高的壓力(通常大于40MPa)下用頂替液沖刷都沒(méi)有問(wèn)題,難道區(qū)區(qū)1ml/min流速下的十幾個(gè)MPa會(huì)造成柱床松動(dòng),?更何況反沖時(shí)通常用的要么是90%水,、要么是90%或純的有機(jī)相,這么低的壓力又能對(duì)柱床造成什么樣的損傷,?還有,,填料的C18長(zhǎng)鏈?zhǔn)擎I合在裸硅膠上的,碳鏈的自由舒展對(duì)分析是zui有利的,,不是說(shuō)你長(zhǎng)期朝一個(gè)方向使用碳鏈就像水草一樣朝一個(gè)方向倒,,用甲醇或乙腈等沖洗之后它會(huì)回復(fù)自由舒展?fàn)顟B(tài)的,即使它們確實(shí)朝一個(gè)方向倒,,那么反向沖洗讓它們恢復(fù)一下初始狀態(tài)豈不是更好,?所以我認(rèn)為反向沖洗不會(huì)對(duì)柱床造成影響。 那哪些柱子不能反向沖洗呢,?我認(rèn)為有兩種是不能反向沖洗的,一種是兩端篩板不一樣不宜進(jìn)行反沖操作,,因?yàn)槿肟诙撕Y板孔徑大一些會(huì)比較能耐固體顆粒物質(zhì)的堵塞,,至少被堵的時(shí)間會(huì)相對(duì)較長(zhǎng),這種情況下一旦反沖就有可能造成填料的流失,,導(dǎo)致柱效下降,。另一種是有柱頭塌陷的色譜柱不宜反沖,因?yàn)橹^塌陷了在柱頭上留下空間,,反沖會(huì)導(dǎo)致柱床移動(dòng),,填料松動(dòng)、重新分布,,但這種柱子您認(rèn)為還能使用嗎,?柱頭塌陷意味著柱頭前面造成比較大的死體積,峰形只怕是早就變樣了,,您還能指望用這樣的柱子進(jìn)行分析,?所以對(duì)這種柱子而言反不反沖已經(jīng)沒(méi)有任何意義了,因?yàn)樗呀?jīng)是根廢柱子,。
還說(shuō)一下反向沖洗的優(yōu)勢(shì),。兩個(gè)理由,,一是固體顆粒物質(zhì)通常會(huì)累積在柱頭上,正向沖洗是無(wú)法洗下來(lái)的,,而反向沖洗則多多少少能沖下來(lái)一些,,延緩了柱壓升高的時(shí)間。二是強(qiáng)保留物質(zhì)在柱頭上的累積,,正向沖洗需要沖洗整個(gè)柱床的距離,,本身就是強(qiáng)保留的東西,要想把它沖下來(lái)得需要花多少時(shí)間,?也許用純甲醇或乙腈沖洗1個(gè)小時(shí)也沖洗不下來(lái),,反而造成了對(duì)柱床的二次污染;而反沖則只需要沖洗柱頭上一點(diǎn)點(diǎn)的距離,,也許1cm長(zhǎng)度都不到,,相比正向沖洗該要容易得多。
由上理由,,孰優(yōu)孰劣結(jié)論自然不難得出,。
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