紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜,。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息,?？梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
　　根據(jù)Lambert-Beer定律：A=εbc,，（A為吸光度,，ε為摩爾吸光系數(shù)，為液池厚度,，c為溶液濃度）可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析,。
　　你可以用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定定三種農(nóng)藥的波長(zhǎng)在某溶液中的zui大、zui小吸收波長(zhǎng),。
　　配制溶液－在光譜檢測(cè)項(xiàng)下進(jìn)行－調(diào)整檢測(cè)光譜范圍及速度--掃描光譜圖--吸光度zui大處對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)為zui大吸收波長(zhǎng),，吸光度zui小處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)為zui小吸收波長(zhǎng)。
　　UV765紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)操作規(guī)程
　　一,、開機(jī)
　　開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,，確認(rèn)電源是否連接。打開儀器電源開關(guān),，等待儀器自檢通過(guò),，自檢過(guò)程中禁止打開樣品室。
　　二,、使用
　　自檢結(jié)束后（7個(gè)項(xiàng)目均出現(xiàn)OK字樣）,，儀器進(jìn)入主菜單，屏幕顯示如下七個(gè)功能項(xiàng)：1.光度測(cè)量,；2.光譜測(cè)量,；3.定量測(cè)量；4.動(dòng)力學(xué)測(cè)量,；5.數(shù)據(jù)處理,；6.多波長(zhǎng)測(cè)定；7.系統(tǒng)狀態(tài)設(shè)定。儀器經(jīng)30min熱穩(wěn)定后,，就可以進(jìn)入正常測(cè)量,。
　　1.光度測(cè)量測(cè)定一定波長(zhǎng)下的透光率（T％）或吸光度值（A）
　　在主菜單中選中[光度測(cè)量]項(xiàng)后，按[ENTER]鍵進(jìn)入此功能塊→按[GOTOWL]鍵進(jìn)入波長(zhǎng)設(shè)置用數(shù)字鍵輸入你所需的波長(zhǎng)值→按[ENTER]鍵確認(rèn)→屏幕提示：請(qǐng)稍等……,，儀器自動(dòng)將波長(zhǎng)移動(dòng)到你所需測(cè)定的波長(zhǎng)值→按[F1]鍵,，選擇測(cè)定透光率（T％）或吸光度值（A）→打開樣品室蓋，將空白溶液和待測(cè)樣品分布放置比色皿架R位和S1位,，關(guān)上樣品室蓋→按[F3]鍵,，儀器自動(dòng)將比色皿架R位置移動(dòng)到光路中（即空白溶液），屏幕上顯示Cell=R→按[AUTOZERO]鍵,，儀器自動(dòng)對(duì)空白溶液調(diào)零,。屏幕提示：請(qǐng)稍等……→按[F2]鍵，比色皿架移動(dòng)到S1位（待測(cè)樣品）,屏幕上顯示Cell=S1→按[F4]鍵測(cè)量T％或A值
　　測(cè)量完成后
　　1）打印輸出數(shù)據(jù),，按[START/STOP]鍵
　　2）返回主菜單,，按[MODE]鍵
　　2.光譜測(cè)量波長(zhǎng)掃描或光譜掃描，可直接測(cè)定一段波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光譜圖和峰值谷值數(shù)據(jù)
　　在主菜單中選中[光譜測(cè)量]項(xiàng)后,，按[ENTER]鍵進(jìn)入此功能塊→根據(jù)需要設(shè)定測(cè)量模式,、掃描范圍、記錄范圍,、掃描速度,、采樣間隔、掃描次數(shù),、顯示模式各參數(shù),。按[→]、[←],、[↑],、[↓]方向鍵到達(dá)設(shè)定行，進(jìn)行參數(shù)的修改,，并按[ENTER]鍵確認(rèn)→打開樣品室蓋,，將空白溶液和待測(cè)樣品分布放置比色皿架R位和S1位，關(guān)上樣品室蓋→按[F3]鍵,，儀器自動(dòng)將比色皿架R位置移動(dòng)到光路中（即空白溶液）,，屏幕上顯示Cell=R→按[F1]鍵進(jìn)行基線校正。屏幕提示：基線校正……→按[F2]鍵,，比色皿架移動(dòng)到S1位（待測(cè)樣品）,屏幕上顯示Cell=S1→按[START/STOP]鍵開始光譜掃描→屏幕顯示掃描圖譜
　　掃描結(jié)束后
　　1）打印結(jié)果譜圖,，按[F4]鍵
　　2）直接讀取峰谷值，按[F2]鍵,，屏幕顯示“請(qǐng)輸入峰/谷檢測(cè)靈敏度”（默認(rèn)值為3）,，按[ENTER]鍵確認(rèn)
　　3）存儲(chǔ)圖譜,，獲取整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),，按[F3]鍵,，用[→],、[←]方向鍵選擇10個(gè)數(shù)字和26個(gè)字母組成文件名,，按[ENTER]鍵確認(rèn)，按[F4]存儲(chǔ),，按1－8數(shù)字鍵確定文件序列號(hào)
　　4）修改譜圖坐標(biāo)范圍,，按[F1]鍵,。修改完畢后，按[START/STOP]鍵確認(rèn)后,，譜圖將按新設(shè)定坐標(biāo)被刷新
　　5）返回上一級(jí)菜單,，按[MODE]鍵
　　3.定量測(cè)定建立濃度曲線，直接測(cè)定樣品的濃度
　　主菜單中選中[定量測(cè)定]項(xiàng)后,，按[ENTER]鍵進(jìn)入此功能塊→根據(jù)需要設(shè)定測(cè)量波長(zhǎng),、測(cè)量單位、測(cè)量方法各參數(shù),。按[→],、[←]、[↑],、[↓]方向鍵到達(dá)設(shè)定行,，進(jìn)行參數(shù)的修改，并按[ENTER]鍵確認(rèn)
　　3.1K系數(shù)法已知斜率k和截距b,，測(cè)出樣品的吸光度值后待入公式就可算出濃度值
　　在測(cè)量方法中選擇K系數(shù)法,，并按[ENTER]鍵確認(rèn)→按[F2]鍵，將k值和b值輸入,，按[ENTER]鍵確認(rèn)→打開樣品室蓋,，在當(dāng)前光路的比色皿架位中放入空白樣品，關(guān)上樣品室蓋→按[AUTOZERO]鍵調(diào)零→將樣品放入比色皿架中→按[START/STOP]鍵進(jìn)入數(shù)據(jù)測(cè)量界面→按[F2]鍵移動(dòng)比色皿架,，使被測(cè)樣品處于光路中→按[START/STOP]鍵測(cè)量
　　3.2單點(diǎn)標(biāo)定法測(cè)量一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光度與坐標(biāo)零點(diǎn)建立工作曲線,，測(cè)定未知樣品濃度
　　在測(cè)量方法中選擇單點(diǎn)標(biāo)定法，并按[ENTER]鍵確認(rèn)→按[F2]鍵修改單點(diǎn)→按數(shù)字鍵輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度值→按[ENTER]鍵→打開樣品室蓋,，在當(dāng)前光路的比色皿架位中放入空白樣品,，關(guān)上樣品室蓋→按[AUTOZERO]鍵調(diào)零→將空白樣品換成標(biāo)準(zhǔn)樣品→按[START/STOP]鍵測(cè)量標(biāo)樣的吸光度并顯示→將樣品放入比色皿架中→按[START/STOP]鍵進(jìn)入樣品測(cè)量界面→按[F2]鍵移動(dòng)比色皿架，使被測(cè)樣品處于光路中→按[START/STOP]鍵測(cè)量
　　3.3多點(diǎn)標(biāo)定法測(cè)量已知濃度的一系列標(biāo)準(zhǔn)樣品吸光度,，建立工作曲線來(lái)測(cè)定未知濃度
　　在測(cè)量方法中選擇多點(diǎn)標(biāo)定法,，并按[ENTER]鍵確認(rèn)→打開樣品室蓋，在當(dāng)前光路的比色皿架位中放入空白樣品,，關(guān)上樣品室蓋→按[AUTOZERO]鍵調(diào)零→按[F2]鍵重新標(biāo)定→按數(shù)字鍵輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品數(shù)→按[ENTER]鍵確認(rèn)→將標(biāo)準(zhǔn)樣品依次放入比色皿架R,、S1、S2位……關(guān)上樣品室蓋→按[F3]移動(dòng)比色皿架R位到光路→按[ENTER]鍵確認(rèn)→按數(shù)字鍵輸入標(biāo)樣濃度值，按[ENTER]鍵確認(rèn)→按[START/STOP]鍵測(cè)量標(biāo)樣的吸光度→按[ENTER]鍵確認(rèn)→按[F2]鍵移樣品位S1到光路,，同樣的方法測(cè)量所有標(biāo)樣的吸光度→按[F1]鍵生成方程曲線,，顯示該曲線的斜率k、截距b,、相關(guān)系數(shù)R→按[MODE]鍵返回定量測(cè)量菜單→按[START/STOP]鍵進(jìn)入數(shù)據(jù)測(cè)量菜單→放入樣品→按[F2]鍵移動(dòng)比色皿架,，使被測(cè)樣品處于光路中→按[START/STOP]鍵測(cè)量
　　6.多波長(zhǎng)測(cè)定同時(shí)測(cè)定幾個(gè)波長(zhǎng)下的透光率（T％）或吸光度值（A）
　　主菜單中選中[多波長(zhǎng)測(cè)定]項(xiàng)后，按[ENTER]鍵進(jìn)入此功能塊→按[F3]鍵設(shè)定測(cè)量波長(zhǎng)數(shù)目和樣品池個(gè)數(shù),，按[ENTER]鍵確定→按數(shù)字鍵輸入相應(yīng)波長(zhǎng)值→打開樣品室蓋,，將空白溶液和待測(cè)樣品分布放置比色皿架R、S1,、S2位……,，關(guān)上樣品室蓋→按[START/STOP]鍵開始測(cè)量
　　測(cè)量完成后
　　1）打印輸出數(shù)據(jù)，按[F4]鍵
　　2）返回主菜單,，按[MODE]鍵
　　三,、關(guān)機(jī)
　　將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈,，倒立晾干,。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩,，做好使用登記,，得到管理老師認(rèn)可方可離開。
　　注意事項(xiàng)：
　　1.開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,，儀器自檢過(guò)程中禁止打開樣品室蓋,。
　　2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過(guò)滿以防液體溢出腐蝕儀器,。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔,，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面,。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí),，需選用石英比色皿。
　　3.測(cè)定時(shí),，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上,，如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K，要盡可能及時(shí)清理干凈,。
　　4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干,。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),，蓋上防塵罩,，做好使用登記，得到管理老師認(rèn)可方可離開,。
　　問(wèn)題處理：
　　1,、如果儀器不能初始化，關(guān)機(jī)重啟,；如不成功,，請(qǐng)向管理老師反映,。
　　2,、如果吸收值異常，依次檢查：波長(zhǎng)設(shè)置是否正確（重新調(diào)整波長(zhǎng),，并重新調(diào)零）,、測(cè)量時(shí)是否調(diào)零（如被誤操作，重新調(diào)零）,、比色皿是否用錯(cuò)（測(cè)定紫外波段時(shí),，要用石英比色皿）、樣品準(zhǔn)備是否有誤（如有誤,，重新準(zhǔn)備樣品）,。
　　UV-1102紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)操作規(guī)程
　　一、開機(jī)
　　開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,，確認(rèn)電源是否連接,。打開儀器電源開關(guān)，等待儀器自檢通過(guò),，自檢過(guò)程中禁止打開樣品室,。
　　二、使用
　　儀器自檢結(jié)束后（7個(gè)自檢項(xiàng)目均出現(xiàn)OK字樣）,，按[MAINMENU]鍵（主菜單）,，屏幕顯示如下5個(gè)功能項(xiàng)：1.Phtometry（定量運(yùn)算）；2.WavelengthScan（波長(zhǎng)掃描模式）,；3.TimeScan（時(shí)間曲線掃描）,；4.System（系統(tǒng)校正）；5.Datadisplay（光度直接測(cè)量模式）,。按相應(yīng)選項(xiàng)前的數(shù)字鍵,，即可進(jìn)入該選項(xiàng)的下一級(jí)子菜單。
　　1.Phtometry（定量運(yùn)算）
　　1）按[MAINMENU]鍵,，再按數(shù)字[1]鍵進(jìn)入Phtometry子菜單下,，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字來(lái)選擇所需的測(cè)定方式：①%T/ABS（透過(guò)率/吸光度測(cè)定模式）；②Ratio（比例測(cè)定模式）,；③Concentration（濃度測(cè)定模式或標(biāo)準(zhǔn)曲線模式）,；
　　2）按數(shù)字[1]鍵進(jìn)入%T/ABS（透過(guò)率/吸光度測(cè)定）子菜單,，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字鍵來(lái)設(shè)定測(cè)定條件：①NUMWL（設(shè)定測(cè)試波長(zhǎng)的數(shù)目，zui多可設(shè)定6個(gè)不同波長(zhǎng)）,；②WLSetting（設(shè)定測(cè)試波長(zhǎng)具體數(shù)值）③DataMode（選擇測(cè)定吸光度或透光率）,，設(shè)定完畢后點(diǎn)擊[Enter]鍵確定，所有項(xiàng)目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定,，等待儀器調(diào)整至準(zhǔn)備狀態(tài),，此時(shí)屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中,，按[Start/Stop]鍵進(jìn)行零點(diǎn)的自動(dòng)調(diào)整,，自動(dòng)調(diào)零完成后，將樣品置于光路中,，再按[Start/Stop]鍵進(jìn)行測(cè)量,，儀器的顯示屏自動(dòng)給出對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)的數(shù)值。
　　3）按數(shù)字[3]鍵進(jìn)入③Concentration（濃度測(cè)定模式或標(biāo)準(zhǔn)曲線模式）,，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字來(lái)設(shè)定條件（波長(zhǎng)數(shù)目,，波長(zhǎng)數(shù)值，標(biāo)準(zhǔn)溶液數(shù)目及濃度）,，設(shè)定完畢后點(diǎn)擊[Enter]鍵確定,，所有項(xiàng)目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定，等待儀器調(diào)整至準(zhǔn)備狀態(tài),，此時(shí)屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO,，將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中，按[Start/Stop]鍵進(jìn)行零點(diǎn)的自動(dòng)調(diào)整,，自動(dòng)調(diào)零完成后,，將標(biāo)準(zhǔn)溶液置于光路中，按照濃度從低到高順序依次按[Start/Stop]鍵進(jìn)行測(cè)量,，測(cè)量完畢后儀器將自動(dòng)給出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，標(biāo)準(zhǔn)曲線下方有三項(xiàng)供選擇：①Process（更改標(biāo)準(zhǔn)曲線的坐標(biāo)和觀察濃度回歸曲線的數(shù)據(jù)）；②Measure（直接進(jìn)入樣品的測(cè)量）,；③Print（打印濃度回歸曲線譜圖和數(shù)據(jù)）,，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字就可執(zhí)行相應(yīng)的功能。
　　4）如果希望返回上一級(jí)菜單,，按[CLEARRETURN]鍵返回,，返回主菜單直接按[MAINMENU]鍵。
　　2.WavelengthScan（波長(zhǎng)掃描模式）
　　1）參數(shù)修改：按[MAINMENU]鍵,，再按數(shù)字[2]鍵進(jìn)入②WavelengthScan（波長(zhǎng)掃描模式）子菜單下,，選中對(duì)應(yīng)的數(shù)字來(lái)選擇所需修改的內(nèi)容，修改掃描的起始波長(zhǎng),，測(cè)量模式,，圖譜坐標(biāo)的上下限,，掃描速度等等。修改完畢按數(shù)字[0]鍵確定,。
　　2）波長(zhǎng)掃描：分別將兩個(gè)比色皿裝上空白溶液和樣品溶液,，放入比色槽中，按[Start/Stop]鍵進(jìn)行譜圖掃描（如想終止掃描再次按按[Start/Stop]鍵）,，待儀器自動(dòng)進(jìn)行基線校正,，提示拉入樣品自動(dòng)測(cè)試，測(cè)試完畢后有掃描圖譜出現(xiàn),，下方有相應(yīng)的數(shù)據(jù)處理選項(xiàng)①Process②Baseline③Print,；
　　3）數(shù)據(jù)處理：按數(shù)字[1]鍵進(jìn)入①Process（數(shù)據(jù)處理），可以讀峰谷值,，修改坐標(biāo),，顯示所有數(shù)據(jù),，求一階倒數(shù)等等功能,。
　　3.TimeScan（時(shí)間曲線掃描）同上（二）操作。
　　4.System（系統(tǒng)校正）,，一般不做,。
　　5.Datadisplay（光度直接測(cè)量模式）同上（二）操作。
　　三,、關(guān)機(jī)
　　將比色皿中的溶液倒盡,，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈；關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),，蓋上防塵罩,，做好使用登記，得到管理老師認(rèn)可方可離開,。
　　注意事項(xiàng)：
　　1.開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,，儀器自檢過(guò)程中禁止打開樣品室蓋。
　　2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3～4/5為宜,，不可過(guò)滿以防液體溢出腐蝕儀器,。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,，切勿用手捏透光面,。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí)，需選用石英比色皿,。
　　3.測(cè)定時(shí),，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K,，要盡可能及時(shí)清理干凈,。
　　4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干,。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),，蓋上防塵罩，做好使用登記,，得到管理老師認(rèn)可方可離開,。
　　問(wèn)題處理：
　　1、如果儀器不能初始化,，關(guān)機(jī)重啟,；如不成功，請(qǐng)向管理老師反映,。
　　2,、如果吸收值異常，依次檢查：波長(zhǎng)設(shè)置是否正確（重新調(diào)整波長(zhǎng),，并重新調(diào)零）,、測(cè)量時(shí)是否調(diào)零（如被誤操作，重新調(diào)零）,、比色皿是否用錯(cuò)（測(cè)定紫外波段時(shí),，要用石英比色皿）、樣品準(zhǔn)備是否有誤（如有誤,，重新準(zhǔn)備樣品）,。