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選購紫外分光光度計考慮的因素

時間:2015/1/6閱讀:3648
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     1.光學構(gòu)造(OPTICAL CONFIGURATION)
  一般來說,,紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類,。顧名思義,,單光束型主要是依賴單束光進行測量,。一束給定波長的光通過對照物,,然后再通過實際樣品溶液,,就能得到吸光結(jié)果,。
  雙光束型則是通過一個斬光輪(mirrored chopper wheel)將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品,??梢詚ui小化光漂移(lamp drift)和減少測量時間。一些雙光型光度計不利用斬光輪,,而是利用一種光束分光器來代替,,將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,,所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態(tài)變化的研究中大有用處,。
  2. 光源和檢測方法(LIGHT SOURCES AND DETECTION)
  分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸,、蛋白或者細菌的生長情況,。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260,、280,、320、595和600nm的波長下測量樣品,。果果需要更大的靈活性,,研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器,可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析,。
  紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,,通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學和半導體研究需要的光譜范圍,。 Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是這樣的儀器,。
  一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見光和甚至紅外光(780 nm 至3,000 nm),。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見光部分(大約380 nm 到800 nm),。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。
  3. 分光光度計的帶寬(bandwidth)
  很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度,??梢酝渡涑鰧嶒炓蟮墓庾V。一種嚴格帶寬使得儀器能對復雜的混合物進行高分辨率的吸光測量,??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要。
  為了測量吸光值,,分光光度計制造商通常使用光電倍增管(photo-multiplier tubes,,PMTs)和光敏二極管。PMTs提供快速的反應(yīng)時間和良好的靈敏度,,并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍,。但一些制造商依賴于光敏二極管的動態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測量。
  4. 樣品類型(SAMPLE FORMAT)
  在大部分的樣品類型中,,分光光度計可接受樣品孔,、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板,。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實驗室需求,。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實驗時間,。
  用小試管cuvette裝樣品容量一般從1 μl-5ml,,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現(xiàn)了柔韌性,。
  5. 數(shù)據(jù)管理(DATA MANAGEMENT)
  大部分單機型的分光光度計包含了驅(qū)動儀器運行和管理數(shù)據(jù)的軟件,。高性能的儀器,通常與PC機一起聯(lián)用,,需要從制造商提供額外的軟件,。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。
  另外一個值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的zui終使用,。各獨立實驗室都有各自感興趣的實驗結(jié)果,。例如一些藥物機構(gòu)需要考慮美國FDA的要求和歐聯(lián)盟的藥物評價機構(gòu)的要求選擇不同的數(shù)據(jù)處理方式。

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