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人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱:
通用名:人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫診斷試劑盒
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清,,血漿及其它相關液體樣本中人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)含量,。
實驗原理
本試劑盒應用間接法測定標本中人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)水平。用純化的人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)標準品和未知濃度的血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)待檢樣品,溫育后,,加入生物素標記的抗IgG抗體,,再與鏈霉親和素-HRP結合,形成免疫復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)濃度,。
試劑盒組成
1 | 20倍濃縮洗滌液 | 50ml×1瓶 |
9 | 標準品S1(800pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
2 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml×1瓶 | 標準品S2(600pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 標準品S3(300pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
4 | 生物素標記的抗-IgG抗體 | 6ml×1瓶 | 標準品S4(150pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 標準品S5(75pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 密封袋 | 1個 |
7 | 終止液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 3張 |
8 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 12 | 說明書 | 1份 |
標本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
操作步驟
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值待入方程式,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存,。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準。
線形范圍:
30pg/ml-1000pg/ml
規(guī)格:
96人份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:,;2-8℃,。
2.有效期:6個月
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