本試劑盒僅供研究使用。

通用名：人流感病毒B（FLU B）酶聯(lián)免疫分析試劑盒

本試劑盒定性測(cè)定人血液、或其它相關(guān)組織中流感病毒B（FLU B）

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）測(cè)定標(biāo)本中人流感病毒B（FLU B）,。用純化的流感病毒B（FLU B）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，可與樣品中流感病毒B（FLU B）相結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的流感病毒B（FLU B）抗體結(jié)合,，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中人流感病毒B（FLU B）的存在與否。

1．標(biāo)本處理：血清,、血漿標(biāo)本可直接檢測(cè)

2．標(biāo)本按要求制備后盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。如不能及時(shí)檢測(cè)，可將標(biāo)本在-20℃保存一個(gè)月,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

3．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

1.         編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔,、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）

2.         加樣：分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽性對(duì)照50μl,。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,，

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。  

4.         配液：將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5,。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl,，再加入顯色劑B 50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘

10.     終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11.     測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

 

  試驗(yàn)有效性：陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10

 臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

 陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為人流感病毒B（FLU B）陰性

 陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為人流感病毒B（FLU B）陽性

1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。

2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。

4． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。

5．底物請(qǐng)避光保存,。

6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),，使用雙波長檢測(cè)時(shí)，參考波長為630nm

7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須注意安全,。

     96人份/盒

1．試劑盒保存：,；2-8℃。

2．有效期：6個(gè)月

 

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