可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線,,下面以“Curve Expert1.4”軟件為例,繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法如下,;
3.單擊[運(yùn)行] 按鈕,,出現(xiàn)如下對話框
4.單擊[ok]按鈕,出現(xiàn)如下兩個對話框,,關(guān)閉下面一個對話框
5. 在對話框的右上角出現(xiàn)一些曲線的名稱,,從“1”開始依次點(diǎn)擊曲線名稱,在右下角會出現(xiàn)相應(yīng)擬合的曲線,。
6. 根據(jù)擬合的曲線選取ELISA擬合度*的曲線雙擊,,出現(xiàn)如下對話框:
注意:選擇系數(shù)(即“r”值)的曲線方程來進(jìn)行運(yùn)算。在下面的對話框
右上角有“r”值 ,,當(dāng)“r”值越接近1擬合度越好
7.按[Ctrl]鍵+[L]鍵,,出現(xiàn)如下對話框:
8.輸入標(biāo)準(zhǔn)的OD值,單擊[Calculate]按忸,,即可得到待測蛋白的實(shí)際含量(標(biāo)本稀釋了N倍,,運(yùn)算出的數(shù)值應(yīng)在乘以N)。
9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程,,可在步驟6的對話框空白處右擊,,選擇”Information”
10. 得到如下對話框:點(diǎn)擊“Copy”
在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù):
Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)
Coefficient Data:
a = -21.531017
b = 212.05019
c = -0.24054479