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ELISA檢測腎綜合征Ag/IgE和Ag/IgD-CIC
抗原抗體雙特異性CIC是同一抗原與不同Is類型抗體IC的集合。其操作步驟如下:兔抗人ISD用0.1mol/L,pH9.6碳酸鹽緩沖液稀釋(終濃度分別為5ug/mL與10ug/mL),,加入40孔聚苯乙烯反應(yīng)板,,每孔0.2mL,,43℃包被過夜,。
用洗滌液PBST(0.01mol/LpH7.4PBS含0,05%Tween-20)洗3次,,加入1:2稀釋的待檢血清(稀釋液為含10%NCS的PBST),,37℃作用2h,洗滌3次,。加入適當(dāng)稀釋的HRP標(biāo)記的兔抗?jié)h坦病毒抗體,,37%作用2h,洗滌3次,。加入OPD-H202底物液,,顯色10—15rain,用2mol/H2S04終止反應(yīng),。將反應(yīng)板置酶聯(lián)免疫檢測儀讀取492nmOD值,。以P/N大于或等于2.1為陽性。
臨床意義:IsE和IgD兩型CIC檢出率的動態(tài)變化相似,,即疾病早期較高,,4~8病日達(dá)高峰,此后漸降,。不同病型腎綜合征出血熱患者兩型CIC檢出情況與病情輕重有密切關(guān)系,,提示此兩型CIC參與了對漢坦病毒的清除及免疫病理反應(yīng)。
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