酶標(biāo)儀的選擇、自檢和校準(zhǔn)

    一,、酶標(biāo)儀的選擇

    面對類型如此眾多的酶標(biāo)儀,，實驗室在選擇時往往有難以適從的感覺。一般來說,，用于酶免疫測定比色的酶標(biāo)儀可分為普通酶標(biāo)儀,，多功能全自動酶標(biāo)儀和全自動酶免疫分析系統(tǒng)等，普通酶標(biāo)儀的功能基本上相當(dāng)于一個微孑L板比色計,，而多功能全自動酶標(biāo)儀除了有微孔板比色功能外,，還有酶標(biāo)動力學(xué)，紫外乃至凝集等多種檢測功能,；全自動酶免疫分析系統(tǒng)則有試劑“開放”和“限定”之分,，所謂試劑“開放”是指不同品牌的ELISA試劑均可用于該儀器，而試劑“限定”則必須使用儀器的酶免測定試劑,。實驗室在選擇酶標(biāo)儀時,，一般應(yīng)遵循這樣幾條原則：

    1．根據(jù)工作需要去選擇。切忌刻意去求功能多,，因為一則如果儀器功能過多,，易出故障，二則有些功能如酶標(biāo)動力學(xué)或凝集等,，可能根本就用不上,；如果擬購置的酶標(biāo)儀主要是用于定性測定,，則不必要求的定量所需的軟件系統(tǒng)。至于全自動酶免疫分析系統(tǒng)則對工作量比較大的血站或大型醫(yī)院較為適用,，對于日常工作量不太大的實驗室,，就無必要。

    2．根據(jù)酶標(biāo)儀的性能去選擇,。反應(yīng)酶標(biāo)儀性能的指標(biāo)主要有測定波長范圍,，濾光片配置，檢測速度,，吸光度范圍,，線性范圍，分辨率,，準(zhǔn)確度,，精密度等。

    3．根據(jù)自己實驗室的財力去選擇,。酶標(biāo)儀品種類型多,，由于性能不一，價格自然也就相差較大,，實驗室可根據(jù)自己的財力去選擇性能／價格比較為合適的酶標(biāo)儀,。

    4．根據(jù)售后服務(wù)去選擇,。實驗室儀器買了以后,，就跟我們家里使用的家用電器一樣，在使用過程中及使用一段時間之后,，很可能就會有保修或維修方面的問題,，因此一定要選擇售后服務(wù)好的公司的酶標(biāo)儀。

    5．根據(jù)實驗室人員的外語水平去選擇,。進口酶標(biāo)儀現(xiàn)有不少已使用中文人機對話,，對于英語上有困難的實驗室，應(yīng)盡可能選用此類酶標(biāo)儀,。

    確定了選擇原則以后,，就是怎樣去選擇了。選擇的步驟首先是要獲取有關(guān)酶標(biāo)儀的信息資料,，一般有這樣幾條途徑：

    ①向已購不同酶標(biāo)儀的多家實驗室同行咨詢訪問,，獲取zui直接的使用效果的信息；

    ②酶標(biāo)儀銷售商的信息廣告及介紹,；

    ③機構(gòu)的儀器評估報告,。

    獲取了盡可能多的酶標(biāo)儀信息資料后，就是對不同類型的酶標(biāo)儀的性能指標(biāo)進行比較,，選擇較為適合本實驗室的一種或二,，三種再向銷售商作進一步的詳細咨詢了解，以決定選擇哪一種進行自檢。

    二,、酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)從上述所獲的酶標(biāo)儀性能的有關(guān)信息資料,，基本上可以說是間接的，有了目標(biāo)以后,，如果還想獲得對某一酶標(biāo)儀的感性認(rèn)識,，可以對其進行自檢，主要有下述幾個方面,。

    （一）外觀

    酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,，型號，編號,，生產(chǎn)廠家,，出廠日期和電源電壓；各調(diào)節(jié)旋鈕,，按鍵和開關(guān)均能正常工作,，外表面無明顯機械損傷；顯示文字應(yīng)清楚完整,。

    （二）酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性（漂移）

    選用492nm波長,，在吸光度o．0A處，測定標(biāo)稱值為1．0A的光譜中性濾光片（測定操作按儀器說明進行）,，記錄儀器示值或均值,，10min后再次記錄儀器示值或均值，前后兩次測定值之差不應(yīng)超過±0．00,。

    （三）吸光度測定的準(zhǔn)確度

    選用405,，492和620 nm波長，以空氣為參比,，分別測定標(biāo)稱值為0．5和1．0A的光譜中性玻璃濾光片,，用測試板代替酶標(biāo)板，按儀器說明連續(xù)測定3次,，按下式計算準(zhǔn)確度：AA＝1／3（A,、+A。+A3）—A：（A：為標(biāo)準(zhǔn)值）,。

    （四）吸光度測定的重復(fù)性

    波長選擇同（3）,，在酶標(biāo)板*排加注空白溶液，第二排加入濃度為200rig／ml的重鉻酸鉀溶液,，重復(fù)測定5次,。記錄每次測定的第二排吸光度值，取第二排任一孔吸光度值與各次對應(yīng)孔吸光度值,。按下式計算重復(fù)性：

    （五）酶標(biāo)儀的線性

選用540nm波長,，將標(biāo)稱值o．5,，1．0A中性濾光片分別放入測試板樣本位置中，以空氣為參比,，各重復(fù)測定3次,；然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測試板的同一孔位中，重復(fù)測定3次,。線性誤差：

    式中A1為*片中性濾光片吸光度均值,，A：為第二片中性濾光片吸光度均值，A1,，2為兩片中性濾光片疊加后的吸光度均值,。

    （六）測定速度的檢定  ．

    選用492nm波長，放人96孔酶標(biāo)板進行測定,，用秒表計測儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時間,。

    酶標(biāo)儀除了在選購時，應(yīng)盡可能自檢外,，在使用中也應(yīng)定期檢定,，以保證酶標(biāo)儀測定的有效性。

    附：200ttg／ml重鉻酸鉀溶液的配制

    將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中（去蓋）置于烘箱中,，在105±5℃下烘2h后,，置于干燥器內(nèi)冷卻30min，在分析天平上準(zhǔn)確稱取o．2829g,，置于100ml燒杯中,，用o．05mol／L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中,，以少量o．05mol／L稀硫酸洗燒杯3次,，洗液并入容量瓶中，用0．05mol／L稀硫酸稀釋至刻度線,，搖勻。

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