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這個(gè)問題是常見的問題,，就是一個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)一直都做得很好，停一段時(shí)間后再做就不行了,。一通亂找原因后還是不行,，很痛苦！

找問題要從大到?。?/p>

1,、PCR擴(kuò)增體系問題
用其他正在進(jìn)行的且擴(kuò)增正常的模板和引物證明PCR擴(kuò)增體系沒有問題，即PCR反應(yīng)混合物,、水,、取液器、PCR儀,、操作等都是好的（陽性對照）

2,、引物問題
用以前擴(kuò)增產(chǎn)物做模板（稀釋50倍），證明引物沒有問題

3,、只是模板問題了,。
因?yàn)闃颖窘到獾目赡苄员纫锝到獾目赡苄愿叩枚唷Ｒ部赡苁菢颖局械囊种莆镞^多（新鮮時(shí)沒有溶出來）,。

不要靠運(yùn)氣找問題,，先做*條很重要。亂找問題常常讓人失去信心的,。