電泳時(shí)膠回收切膠的注意事項(xiàng):
1. 電泳的buffer和gel都是新制的,,切膠的臺(tái)子清理干凈,,刀片洗凈滅菌,總之一句話就是保證切下的帶沒有外源dna污染,。
2. 切膠是要把整個(gè)目的片斷所在位置的膠全部回收,。為了減少膠的體積,可以用相對(duì)比較薄的膠來(lái)做,,只要夠點(diǎn)樣即可,,也可采用薄而寬的梳子來(lái)跑膠。
3. 關(guān)于防護(hù),,在一般有機(jī)玻璃后就足夠了,,戴上防護(hù)面具以保護(hù)眼睛,如果戴樹脂眼鏡就可以了,。要是非常害怕紫外照射,,或者對(duì)于膠有特殊要求,例如要求不含EB,,可以采用點(diǎn)marker和帶刻度的尺子一起照相的方法來(lái)確定目的條帶在膠上的位置進(jìn)行切膠,。
4. 按照正常程序點(diǎn)marker跑膠,然后切下有marker的膠,,EB染色,,紫外燈下與帶刻度的尺子一起照相。由于要回收的帶與marker間的相對(duì)位置已知,,根據(jù)尺子來(lái)衡量未染色膠上目的帶的位置即可,。如果覺得很難判斷,可以直接在marker邊點(diǎn)少量的樣,,這樣位置就容易確定了,。
凝膠成像分析系統(tǒng)的使用和注意事項(xiàng):
凝膠成像分析系統(tǒng):可以應(yīng)用在蛋白電泳凝膠,DNA凝膠,,樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析,,樣品包括:EB、SYBR Green,、SYBR Gold,、Texas Red、GelStar,、Fluoroscecin,、 Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測(cè);以及Coomassie Blue,、SYPRO Orange,、各種染色的蛋白質(zhì)凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見樣品成像)
使用注意事項(xiàng):
? 注意開機(jī)順序,,先開凝膠成像系統(tǒng),,再打開電腦進(jìn)入軟件,。
? 紫外凝膠照相時(shí)要防止EB 污染儀器,凝膠成像系統(tǒng)的門不能用污染的手套接觸,,進(jìn)行軟件操作時(shí)同樣不能被污染的手套接觸,。
? 在使用紫外光源照相的過程中,不可以打開凝膠成像系統(tǒng)前面板,。
? 照相后經(jīng)廢膠取出,,并用較軟的紙擦拭干凈。
? 調(diào)焦時(shí)要輕,,動(dòng)作不要?jiǎng)×摇?/p>
? 環(huán)境電壓 不穩(wěn)定 時(shí),,請(qǐng)使用穩(wěn)壓電源。使用過程中如遇斷電,,請(qǐng)及時(shí)將儀器電源關(guān)閉,,直至重新來(lái)電。
? 使用時(shí),,請(qǐng)先打開儀器的電源開關(guān),,再打開電腦開關(guān)并打開軟件( Quantity One )。
? 保持觀測(cè)室內(nèi)環(huán)境干燥,,及時(shí)將在觀測(cè)板上的水或其他液體檫干(可使用軟質(zhì)紙,一般卷紙即可),。
? 觀測(cè)用 EB (溴乙錠)染色的凝膠時(shí),,注意不要污染儀器表面。千萬(wàn)不要用手直接接觸凝膠,,或戴著接觸過凝膠的手套去接觸儀器的門和觀測(cè)臺(tái)的把手,。
? 使用儀器時(shí),要將門及觀測(cè)臺(tái)關(guān)緊,,否則將無(wú)法正常使用紫外燈,。
? 盡可能不要將電腦連接到因特網(wǎng)或局域網(wǎng)上,同時(shí)在電腦上安裝殺毒軟件(推薦使用正版軟件),,做到專機(jī),。
? 較長(zhǎng)時(shí)間不用儀器時(shí),請(qǐng)將儀器用防塵罩蓋上,。
? 為延長(zhǎng)燈管的使用壽命,,請(qǐng)觀測(cè)好凝膠后及時(shí)關(guān)閉光源(儀器自身有 15 分鐘的自動(dòng)保護(hù)程序)。
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