現(xiàn)代液相色譜中,，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇,。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇,，首先必須對此有一定的認(rèn)識和了解,。下面將對幾種常見的色譜填料極其各種的性能做各一個簡要的介紹。
（1）,、硅膠填料
硅膠填料主要應(yīng)用正相色譜及反相色譜柱中,，正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團,，如胺基團(NH2,APS)和氰基團（CN,，CPS）的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他團的極性較強,，因此,，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱的組份zui先被沖洗出色譜柱,。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,，如：正乙烷（Hexane）,氯仿（Chloroform）,二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),，表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相,。反相色譜所使用的流動相極性較強，通常為水,，緩沖液與甲醇,，已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合zui先被沖出,，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留,。常用的反相填料有C18（ODS）,、C8（MOS）、C4（B）,、C6H5（Phenyl）等,。
（2）、聚合物填料
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,，其主要優(yōu)點是在PH值為1～14均可使用,。相對與硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有更強的疏水性,；大孔的聚合物填料對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效?，F(xiàn)在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低,。
（3）,、其他無機填料
其它HPLC的無機填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì),，一般于特殊的用途,。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),，不再需其它的表面改性，該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強,，石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體,，又由于HPLC流動相中不會被溶解，這類柱可在任何PH與溫度下使用,。氧化鋁也可用于HPLC,，氧化鋁微粒剛性強，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,，其優(yōu)點是可在PH高達(dá)12的流動相中使用,。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強，應(yīng)用范圍受到一定的限制,，所以未能廣泛應(yīng)用,，新型氧化鋯填料也可用于HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱,，應(yīng)用PH范圍1～14,，溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料幾年才開始研究,，加之面臨的實驗難度,，其重要用途與優(yōu)勢尚在進(jìn)行中。
二,、怎樣選擇填料粒度
目前,，商品化的色譜料粒度從1um到超過30um均有銷售,，而目前分析分離主要用3um、5um和10um填料,，填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù)，即柱效和背壓,。粒度越小,，填充柱的柱效越高；小于3um的填料應(yīng)用,，在相同選擇性條件下,，提高柱效可提高分離度，但不是*的因素,。如果固定相選擇是正確,，但是分離度不夠，那么選擇更小粒度的填料是很有用的,，3um填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%,；然而，3um的色相譜的背壓卻是5um的2倍,。與此同時,，柱效提高意味著在相同條件下可以選擇更短的色譜柱，以縮短分析時間,，另外,，可以采用低粘度的溶劑做流動相或增加色譜柱的使用溫度，比如用乙腈代替甲醇,，以降低色譜柱的壓力,。
三、如何保證良好的柱性能與柱壽命
◆ 認(rèn)證閱讀色譜柱使用說明書,；
◆ 使用填充良好的色譜柱,；
◆ 盡量減少壓力波動，避免機械及熱沖擊,；
◆ 使用保護柱及在線過濾器,；
◆ 經(jīng)常以強溶劑沖洗色譜柱；
◆ 充分過濾樣品及流動相,，盡量避免雜質(zhì)微粒與強保留成分,；
◆ 用穩(wěn)定的固定相（C18zui穩(wěn)定）；
◆ 在中等PH值操作（6~8）,，用有機緩沖溶液,；
◆ 色譜柱使用溫度小于40℃；
◆ 硅膠基質(zhì)的的色譜柱,，應(yīng)保持流動相的PH值范圍在3.0~8.0,；
◆ 在水流動相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉,；
◆ 流動相中含有緩沖溶液，應(yīng)注意應(yīng)95∶5的水及有機溶劑過渡,，有機溶劑不能低于5%,；
◆ 貯存時，沖洗掉鹽和緩沖液,，用純有機溶劑流動相保存（乙晴）,。
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