摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類，機理明確,，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù)，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制,、新藥篩選評價等研究。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制,、治療。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。
摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類，機理明確,，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚,、水螅等。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL),。FL在Mg、ATP、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α，β1,，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò)、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù)。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。相信,，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值。
摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué),、食品、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確,，應(yīng)用廣泛。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌、真菌,、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚,、水螅等。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL),。FL在Mg、ATP,、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理、藥物機制,、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染、復(fù)制,、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1,，β2)對INF-α作用的影響，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類，機理明確,，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌,、昆蟲等；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理、藥物機制,、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染、復(fù)制,、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC)，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α，β1,，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確,，應(yīng)用廣泛。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌、真菌,、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚,、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase，BL),。FL在Mg,、ATP、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC)，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α，β1,，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò)、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)龋珻heng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù)。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān)，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。
摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué),、食品、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確,，應(yīng)用廣泛。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌、真菌,、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚,、水螅等。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg、ATP,、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理、藥物機制,、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染、復(fù)制,、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選,、評價提供依據(jù)。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1,，β2)對INF-α作用的影響，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān)，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué)、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌,、昆蟲等；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制,、新藥篩選評價等研究。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制,、治療。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC)，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān)，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān)，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué),、食品、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確,，應(yīng)用廣泛。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚,、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase，BL),。FL在Mg,、ATP、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù)，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制,、新藥篩選評價等研究。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制,、治療。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC)，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1,，β2)對INF-α作用的影響，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉、脾、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò)、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)龋珻heng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān)，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué)、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù)，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制,、新藥篩選評價等研究。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制,、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類，機理明確,，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚,、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α，β1,，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān)，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類，機理明確,，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚,、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase，BL),。FL在Mg,、ATP、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù)，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制,、新藥篩選評價等研究。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制,、治療。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選,、評價提供依據(jù)。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α，β1,，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò)、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)龋珻heng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān)，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué)、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌、真菌,、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚,、水螅等。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL),。FL在Mg、ATP,、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選,、評價提供依據(jù)。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1,，β2)對INF-α作用的影響，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān)，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚、吡啶、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù)。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。相信,，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué)、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌,、昆蟲等；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚,、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù)，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制,、新藥篩選評價等研究。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制,、治療。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類，機理明確,，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母、珊瑚,、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase，BL),。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α，β1,，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò)、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)龋珻heng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù)。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。相信,，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué),、食品、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確,，應(yīng)用廣泛。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌、真菌,、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚,、水螅等。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL),。FL在Mg、ATP,、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1,，β2)對INF-α作用的影響，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù)。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。相信,，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué)、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌,、昆蟲等；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理、藥物機制,、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染、復(fù)制,、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生物科學(xué),、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類，機理明確,，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染,、復(fù)制、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒,，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞,，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型，為肺癌進展,、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC)，獲得了GFP基因表達,、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ)。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化，為益生素篩選,、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因,，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α，β1,，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉,、脾、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù)。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān)，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信，隨著研究的進一步深入,，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué),、食品、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類,、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確,，應(yīng)用廣泛。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要,。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生命科學(xué)、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光素酶的細菌、真菌,、昆蟲等,；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚,、水螅等。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源,，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL),。FL在Mg,、ATP、O2的參與下,，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素，并放出光子,，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下,，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸,、脫氫酪氨酸、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光,，無需任何底物或輔助因子。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性,、高靈敏度、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究,、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理,、藥物機制、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染、復(fù)制,、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確,、簡單、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選,、評價提供依據(jù)。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義,。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1,，β2)對INF-α作用的影響，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α,，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性,。
Ikawa制作了在肌肉、脾,、腎,、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠,，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象,，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚,，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠,、快速的方法。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸,、信息轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草,，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系,，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化。王亞以DiFMI為底物,，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法，尤其對大批量,、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器,，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān),，發(fā)光細菌可簡便、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚,、吡啶、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明,，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2,。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測,，是一項值得推廣的新技術(shù)。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測,，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品,、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。摘要：
目的：了解生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué),、生物科學(xué)、食品,、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
方法：對有關(guān)的文獻中生物發(fā)光種類、機理及其在上述領(lǐng)域的具體應(yīng)用進行綜述,。
結(jié)果：生物發(fā)光有兩類,，機理明確，應(yīng)用廣泛,。
結(jié)論：生物發(fā)光在很多領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛,，對其深入了解和研究至關(guān)重要。
生物發(fā)光是生物發(fā)光器在細胞或生物體內(nèi)發(fā)生光能釋放反應(yīng)的過程,。本文簡要介紹生物發(fā)光種類,、機理及其在醫(yī)學(xué)、生命科學(xué),、食品和環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用,。
1 種類
生物發(fā)光主要有2種：①發(fā)生化學(xué)或生物學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生的光能信號，主要有含熒光素酶的細菌,、真菌,、昆蟲等；②被激發(fā)后產(chǎn)生的光能信號,，主要有含熒光蛋白的水母,、珊瑚、水螅等,。
2 機理
2．1熒光素酶
熒光素酶是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。依來源，可分為螢火蟲熒光素酶(1uciferasefrom firefly,，F(xiàn)L)和細菌熒光素酶(bacterial lucifer_ase,，BL)。FL在Mg,、ATP,、O2的參與下，催化D-熒光素氧化脫羧,，產(chǎn)生激活態(tài)氧化熒光素,，并放出光子，產(chǎn)生550～580nm的熒光,。BL以脂肪醛為底物,，在還原型黃素單核苷酸及氧的參與下，使脂肪醛在氧化為脂肪酸的同時放出光子,，產(chǎn)生490nm的熒光,。
2．2 熒光蛋白
熒光蛋白中GFP(green fluorescent protein)研究zui清楚,。GFP含有的特殊生色團是由蛋白質(zhì)內(nèi)部第65-67位絲氨酸、脫氫酪氨酸,、甘氨酸自身環(huán)化和氧化形成的,，用紫外或藍光激發(fā)即能發(fā)出肉眼可見的綠色熒光，無需任何底物或輔助因子,。
3 應(yīng)用
生物發(fā)光作為一種非放射性,、非創(chuàng)傷損害性、高靈敏度,、實時動態(tài)的檢測技術(shù),，在醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究、食品及環(huán)境檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,。
3．1在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
生物發(fā)光可對特定細胞或分子行為進行非侵入性連續(xù)動態(tài)觀察,，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛用于致病機理、藥物機制,、新藥篩選評價等研究,。
熒光素酶被廣泛應(yīng)用于研究病毒感染、復(fù)制,、治療,。Luker用熒光素酶基因標(biāo)記牛痘病毒，免疫1h后即可測得細胞內(nèi)熒光,，熒光的變化量直接反映病毒的復(fù)制量,。王建東利用熒光素酶基因標(biāo)記肺癌細胞，并將其接種于嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠皮下,，成功建立了穩(wěn)定表達熒光素酶報告基因的肺癌細胞系及異種移植動物模型,，為肺癌進展、轉(zhuǎn)移以及藥物敏感性等相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ),。
朱紅梅用綠色熒光蛋白基因gfp基因標(biāo)記毒性大腸桿菌(ETEC),，獲得了GFP基因表達、遺傳穩(wěn)定的發(fā)光標(biāo)記菌株,，為進一步研究ETEC侵染途徑及致病機理奠定了基礎(chǔ),。通過ETEc標(biāo)記的GFP熒光可準(zhǔn)確、簡單,、快速反應(yīng)細菌易位率的變化,，為益生素篩選、評價提供依據(jù),。
3．2在生物科學(xué)研究中的應(yīng)用
3．2．1在分子生物學(xué)中的應(yīng)用熒光素酶基因廣泛應(yīng)用于不同啟動子下外源基因表達強度和轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究,，尤其對低水平表達的調(diào)控方式有較大意義。姚文娟以熒光素酶基因為報告基因，探討HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)后調(diào)節(jié)序列(HPRE)的功能元件(α,，β1，β2)對INF-α作用的影響,，HPRE的功能元件β2與INF-α作用zui為密切,，而α，β1在INF-α應(yīng)答中作用甚小,。熒光素酶還用于研究植物生理節(jié)奏,，Mmar曾用螢光酶作報告基因研究擬南芥基因表達節(jié)律性。
Ikawa制作了在肌肉,、脾,、腎、心臟等器官中表達GFP的轉(zhuǎn)基因小鼠,，表明GFP可作為胚胎移植前有效的選擇標(biāo)記,，對胚胎進行熒光檢測可以有選擇地培育轉(zhuǎn)基因小鼠，大大提高轉(zhuǎn)基因動物的制作率,，減少了胚胎移植的盲目性,。單志新以巨噬細胞移動抑制因子基因為研究對象，利用GFP作報告分子篩選出能有效抑制巨噬細胞移動抑制因子基因表達的siRNA,。
3．2．2在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用
R Paulmurugan應(yīng)用蟲熒光素酶對成肌調(diào)節(jié)因子和細胞分化抑制因子間強烈的相互作用進行了研究,。sung用這種原理把海星熒光素酶進行了剪切與重聚，研究雄激素受體在小鼠中的易位作用,。為研究細胞網(wǎng)絡(luò),、哺乳動物細胞中蛋白質(zhì)磷酸化提供了一個可靠、快速的方法,。
GFP融合蛋白可以觀察細胞骨架的動態(tài)變化,、細胞器動力學(xué)和內(nèi)膜系統(tǒng)的運輸、信息轉(zhuǎn)導(dǎo),、病毒的運動和大分子的運輸?shù)?，Cheng用gfp基因修飾煙草花葉病毒并感染煙草，用激光掃描共聚焦顯微鏡,，觀測到病毒維管束浸染路徑和積累方式,。
3．3監(jiān)測環(huán)境
發(fā)光細菌發(fā)光強度與某些污染物濃度呈較好的線性關(guān)系，能穩(wěn)定,、快速地測定污染物濃度變化,。王亞以DiFMI為底物，建立的熒光蛋白磷酸酶抑制法(F_PPIA)檢測環(huán)境樣本中MC結(jié)果和HPLC法檢測結(jié)果相關(guān)性較好,，作為一種快速檢測方法,，尤其對大批量、低濃度MC水樣的監(jiān)測有較好的應(yīng)用前景,。于海將發(fā)光細菌固定于光纖表面,，與光檢測系統(tǒng)結(jié)合,，開發(fā)了一種發(fā)光細菌光纖傳感器，用于水中污染物毒性快速監(jiān)測和評價具有較好的準(zhǔn)確性和靈敏度,。
3．4檢驗食品
3．4．1色素
黨亞愛證明17種常用色素對發(fā)光細菌均有一定的急性毒性,，細菌發(fā)光強度與色素毒性呈負相關(guān)，發(fā)光細菌可簡便,、快速檢測色素口,。
3．4．2 致癌物
江敏研究了吲哚、吡啶,、喹啉等6種含氮雜環(huán)化合物對發(fā)光細菌的急性毒性作用,。結(jié)果表明，發(fā)光細菌的相對發(fā)光度均隨化合物濃度增加而線性降低,，具良好相關(guān)性,。
3．4．2微生物
高岳利用ATP生物發(fā)光技術(shù)對脫水香菇細菌污染情況進行了快速檢測試驗L2。結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)細菌培養(yǎng)方法有良好相關(guān)性,，且不需復(fù)雜的設(shè)備,，可用于食品快速篩選和現(xiàn)場檢測，是一項值得推廣的新技術(shù),。
3．4．3檢測農(nóng)藥殘留
袁東星發(fā)現(xiàn)發(fā)光細菌發(fā)光強度與有機磷農(nóng)藥濃度呈負相關(guān),，可用于現(xiàn)場快速檢測，稍加改進便可用于食品中多種毒物檢測,。
4小結(jié)與展望
生物發(fā)光技術(shù)已在生物醫(yī)學(xué),、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)保等領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用,。相信,，隨著研究的進一步深入，它將在理論研究和實際應(yīng)用中產(chǎn)生更大的價值,。
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