層析分離技術(shù)是我國高?！渡治鰧嶒灐分械幕A(chǔ)實驗,。70年代后期國內(nèi)研制的“核酸蛋白檢測儀"，使用某一波長（280nm或254nm等）進(jìn)行定性檢測分離,，用記錄儀描譜,，長期在高校實驗室使用。在我國科技人員努力下,，近年來,，市場上相繼出現(xiàn)了可代替記錄儀的“電腦采集器"、“電腦核酸蛋白檢測儀",、“雙波長電腦核酸蛋白檢測儀",、“層析-電導(dǎo)聯(lián)用系統(tǒng)"等產(chǎn)品，迅速應(yīng)用到教學(xué)實驗,、科學(xué)研究和藥物生產(chǎn)領(lǐng)域,。
一、 檢測原理
所有紫外吸收檢測器工作原理都是基于光的吸收定律---朗伯-比耳定律,。該定律指出,，當(dāng)一束單色光(λ)輻射通過稀濃度物質(zhì)溶液時，如果溶劑不吸收光,，則液體的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度和光經(jīng)過溶液的距離成正比,。其關(guān)系式為：
A(λ)=a(λ)bc
A=-LgT=Lg1/T
二、層析裝置分類：
按描譜方式分有：記錄儀描譜和電腦描譜（外加采集分析器）
按檢測波長分有：單波長檢測和雙波長（多波長）同步檢測
按檢驗器分有：核酸蛋白檢測和核酸蛋白檢測,、電導(dǎo)檢測聯(lián)用
三,、傳統(tǒng)檢測儀：
傳統(tǒng)層析實驗裝置由單波長核酸蛋白檢測儀（外加電腦采集器或?qū)㈦娔X采集器裝入檢測儀中也屬此類）、層析柱,、恒流泵,、部分收集器和記錄儀等部件構(gòu)成,。用一種波長（如280nm或254nm等）下對已知物質(zhì)（蛋白或核酸等）進(jìn)行實驗檢測，高校實驗室的層析實驗裝置大多屬于此類,。特點如下：
1、檢測前必須選定一種波長（280nm,、254nm）進(jìn)行檢測,，利用物質(zhì)特征波長分離已知組分。
2,、要求學(xué)生在檢測前一定要先調(diào)整透過率為100%,，然后再調(diào)整吸光度為0。學(xué)生經(jīng)常會問：雖然透過率和吸光度在此點（T=100%,，A=0）符合了A=lg(1/T)關(guān)系,，但怎樣保證在測量范圍內(nèi)都符合朗伯--比爾定律？
3,、傳統(tǒng)檢測儀為保證測量讀數(shù)落在儀器有效測量范圍內(nèi),，在儀器面板上都設(shè)有靈敏度選擇裝置（2.0A、1.0A,、0.,、0.2A、0.1A,、0.0等）,。因此，測量前要選擇合適的靈敏度,；②真正吸光度值是儀器顯示數(shù)與靈敏度的乘積,；③測量中不要改變靈敏度，否則可能會帶來基線變化,。
4,、傳統(tǒng)檢測儀在不同靈敏下的測量結(jié)果均為0-10mv直流信號，將此信號輸出到記錄儀或電腦采集器,。顯然,，記錄紙或電腦屏幕上的吸光度也并非樣品實際的吸光度，也應(yīng)受到儀器靈敏度的調(diào)制,。
四,、新型檢測儀
以對蛋白、核酸,、肽等生物大分子物質(zhì)的檢測,、分離和純化為目的，新型層析實驗系統(tǒng)中的電腦核酸蛋白檢測系統(tǒng)具有以下特點：
1,、系統(tǒng)智能調(diào)整吸光度到0.000,，透光率到100%,。，并在測量范圍內(nèi)的吸光度和透過率嚴(yán)格符合A=Lg(1/T),。
2,、單波長檢測或雙波長同步檢測。
3,、系統(tǒng)自帶數(shù)據(jù)采集工作站,，檢測、采集,、軟件工作站一體化系統(tǒng)集成,。分析軟件具有實時描譜、分析參數(shù),、圖譜保存,、圖譜打印、圖譜編輯等功能,，提供峰高,、峰寬、峰面積,、歸一化,、保留時間、半峰寬,、峰底寬,、面積含量、純度,、層析柱分辯率等參數(shù),。
zui近出現(xiàn)的“單波長核酸蛋白檢測_電導(dǎo)檢測聯(lián)用系統(tǒng)"、“雙波長核酸蛋白檢測_電導(dǎo)檢測聯(lián)用系統(tǒng)"和“三波長核酸蛋白檢測_電導(dǎo)檢測聯(lián)用系統(tǒng)"等產(chǎn)品,，為科學(xué)研究,、尋找目標(biāo)物分離條件和提高工作效率提供了新方法。
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