那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下蛋白純化通用問題(二),。
7、填料如何儲(chǔ)存,?
答:請(qǐng)參考說明書,。大部分填料可以在 4-40℃ 儲(chǔ)存,不可以冷凍,,注意北方的冬天有時(shí)候室溫低于零度,,運(yùn)輸和儲(chǔ)存應(yīng)避免凍住,。儲(chǔ)存過程中,注意避免填料干掉,,或低溫產(chǎn)生氣泡,。
儲(chǔ)存液 :對(duì)于耐堿的層析介質(zhì),,可以使用 0.01M NaOH 作為儲(chǔ)存液 ,;對(duì)于不耐堿比如親和介質(zhì),,一般是用 20% 的乙醇或 2% 苯甲醇作為儲(chǔ)存試劑,。
8,、樣品與緩沖液怎么脫氣和過濾,?
答:溶液和樣品必須過濾(0.2um或者0.45um的濾膜過濾)和脫氣,,可以使用負(fù)壓抽濾瓶過濾,,并且在負(fù)壓條件下保持10min脫氣,。脫氣的方法還包括:超聲15min以上或者使用注射用水配制緩沖液,。對(duì)于小體積樣品的過濾,可以使用高速離心的方式,,吸取上清,。
9、AKTA系統(tǒng)的清洗和保存,?
答:按時(shí)清洗系統(tǒng)或遇到問題時(shí)清洗系統(tǒng),。用1M NaOH ,小流速清洗系統(tǒng)30min,,之后立即用0.5M NaCl和去離子水將NaOH沖洗干凈并且系統(tǒng)pH保持在中性,。系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間不使用,需保存在20%乙醇中,。
10,、如何進(jìn)行柱前壓校準(zhǔn)?
答:取決于柱位閥,,斷開所有流路,,在system control-system-calibration-歸零。
11,、AKTA pure與prime plus的*大耐受壓力,?
答:pure 25是20Mpa,pure 150是5Mpa,;prime plus 是1Mpa,;紫外電導(dǎo)2MPa,PH電極耐壓0.5MPa,。
12,、如何設(shè)置報(bào)警壓力?
答:
系統(tǒng)配有多柱位閥:
可以檢測(cè)柱子的柱前Pre C壓力,柱后Post C壓力,,并且計(jì)算出Delta C壓力,。
分別設(shè)置Pre Column Pressure和Delta Column Pressure的壓力報(bào)警保護(hù)柱子。
系統(tǒng)無多柱位閥:
先用管道代替柱子連接設(shè)備,,在工作流速下測(cè)定系統(tǒng)本身的壓力,,此為空載壓力。
Pre Column Pressure為Max Pre-Column Pressure和Max Delta Column Pressure+空載壓力中較低值,。
13,、在正確設(shè)置了報(bào)警壓后,層析柱接入AKTA,,總是超壓報(bào)警,?
答:首先判斷AKTA系統(tǒng)是否本身壓力過高,在線濾膜或者反壓閥堵塞,,正常情況下反壓閥空跑系統(tǒng)壓力為0.2左右,。如果系統(tǒng)沒有問題,接入柱子出現(xiàn)超壓,,可能是柱子堵塞或者連接柱子的管線折彎造成超壓,,調(diào)整連接管線或者按說明書方式清洗層析柱。
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于蛋白純化通用問題(二),。
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