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淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問(wèn)題(一)

閱讀:1670      發(fā)布時(shí)間:2022-7-1
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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問(wèn)題(一):
       說(shuō)到氣泡,,你可能會(huì)聯(lián)想到酣暢淋漓的可樂(lè),,通透上頭的啤酒,亦或是流光飛舞的浪漫,,生活中的氣泡,,似乎還帶有那么一絲美好,然而對(duì)于實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),,尤其是在大多不會(huì)配置在線脫氣單元的FPLC系統(tǒng)上做的層析實(shí)驗(yàn),,氣泡就如煩人的蒼蠅,鞋里的石子,,令人如鯁在喉不吐不快,,如若是重要樣品、昂貴填料,,氣泡帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)失敗那簡(jiǎn)直是小型災(zāi)難現(xiàn)場(chǎng),。那么氣泡是源自何來(lái),而又去之何處,,怎么能讓它們從我們的系統(tǒng)里消失,,以下此篇,做一個(gè)小小探討,,拋磚引玉,,共謀對(duì)策而滅之。



關(guān)于氣泡來(lái)源,,正如病從口入,,無(wú)非就是進(jìn)入系統(tǒng)的開(kāi)口處:流動(dòng)相,或者流路中相對(duì)負(fù)壓處的漏點(diǎn),;如果流動(dòng)相脫氣不理想或儀器本身連接管路,、組件存在問(wèn)題,流路中將形成肆意妄為的氣泡,引發(fā)一系列問(wèn)題: 

      1. 組分峰面積變化,,峰形變化,;
      2. 形成尖峰或鋸齒狀噪聲;
      3. 出現(xiàn)鬼峰 ,,基線漂移波動(dòng)增大,;
      4. 泵動(dòng)作失常,壓力波動(dòng),,檢測(cè)基線全抖,;
      5. 填料走空,干柱,;
      6. 溶解氧可能氧化樣品組分和(或)流動(dòng)相及固定相組分,,使檢測(cè)失真。

實(shí)際案例



Fig.1 氣泡造成的UV雜峰

Fig.2 氣泡造成的系統(tǒng)壓力波動(dòng)


      這些癥狀基本能覆蓋大部分的層析實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,,可見(jiàn)氣泡的破壞力和惱人程度,,知己知彼方才能有的放矢,那么氣泡是如何形成的呢,?流動(dòng)相中氣體形成的原因有多種,,*根本的還是由于氣體在液體中達(dá)到過(guò)飽和狀態(tài);平衡狀態(tài)時(shí)溶解空氣的量與溶液的性質(zhì),、氣體的種類有關(guān),,也與外界條件有關(guān), 主要的外界條件有以下 3 種。






一般來(lái)說(shuō),,溶劑中能溶解氣體的量隨溫度的升高而降低,,而當(dāng)溶劑從低溫狀態(tài)下移至高溫時(shí),過(guò)量溶解的氣體以氣泡形式逸出,。因此,緩沖液溫度的變化,,較易引起氣泡的形成,。

● 正如我們配置的緩沖液很多時(shí)候會(huì)保存于層析柜的低溫環(huán)境,當(dāng)實(shí)驗(yàn)需要使用時(shí)從層析柜中取出,,在室溫環(huán)境下會(huì)帶來(lái)溫度的劇烈變化,,改變氣體溶解性,進(jìn)而產(chǎn)生氣泡,,影響實(shí)驗(yàn),,因此緩沖液的使用如果有溫度的變化需要在實(shí)驗(yàn)溫度下擺放一段時(shí)間,,釋放氣泡后再使用,;
● 如果層析儀器是在非恒溫實(shí)驗(yàn)室,晝夜會(huì)有溫差,白天做完實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)保存,,經(jīng)歷夜晚的溫度變化,,第*二天系統(tǒng)里很可能會(huì)出現(xiàn)氣泡,此時(shí)實(shí)驗(yàn)之前充分System wash就非常重要,,需要使用高流速將系統(tǒng)內(nèi)的氣泡吹掃出來(lái),,避免影響實(shí)驗(yàn)。


● 當(dāng)檢測(cè)器池處于較高溫度時(shí),,池中易產(chǎn)生氣泡,,因?yàn)橐毫魍ㄟ^(guò)檢測(cè)器時(shí),溫度升高而此處的壓力反而減小,。如果氣泡形成于檢測(cè)器池中,,則將出現(xiàn)尖峰狀或鋸齒狀的基線噪聲,甚至于*無(wú)法測(cè)定,,因此在系統(tǒng)流路中,,升溫組件與流路保持相應(yīng)的溫度隔斷,系統(tǒng)流路溫度的均一性,,也非常重要,。


以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問(wèn)題(一)。

我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超蛋白純化系統(tǒng),、超微量核酸蛋白測(cè)定儀,、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng),、紫外分析儀,、核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀,、光化學(xué)反應(yīng)儀,、旋渦混合器、恒流泵,、自動(dòng)部分收集器等為核心的十幾個(gè)產(chǎn)品系列的廠家,,歡迎大家前來(lái)訂購(gòu)


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