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薄層色譜法(三)操作

閱讀:2029      發(fā)布時(shí)間:2022-4-6
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那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于薄層色譜法(三)操作:
薄層板
除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,,去除表面的氣泡后,,倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布(厚度為0.2~0.3mm),,取下涂好薄層的玻板,,置水平臺(tái)上于室溫下晾干,后在110℃烘30分鐘,,即置有干燥劑的干燥箱中備用,。使用前檢查其均勻度(可通過(guò)透射光和反射光檢視),。
手工制板一般分不含粘合劑的軟板和含粘合劑的硬板倆種。
常用吸附劑的基本情況:顆粒的大小,,太大洗脫劑流速快分離效果不好,,太細(xì)溶液流速太慢。一般說(shuō)來(lái)吸附性強(qiáng)的顆粒稍大,,吸附性弱的顆粒稍小,。氧化鋁一般在100-150目。氧化鋁分為堿性氧化鋁,,適用于碳?xì)浠衔?、生物堿及堿性化合物的分離,一般適用于PH為9-10的環(huán)境,。中性氧化鋁適用于醛,、酮、醌,、酯等PH約為7.5的中性物質(zhì)的分離,。酸性氧化鋁適用于PH4~4.5的酸性有機(jī)酸類(lèi)的分離。氧化鋁,、硅膠根據(jù)活性分為五個(gè)級(jí),,上等活性*高,五級(jí)*低,。
黏合劑及添加劑:為了使固定相(吸附劑)牢固地附著在載板上以增加薄層的機(jī)械強(qiáng)度,,有利于操作,需要時(shí)在吸附劑中加入合適的黏合劑:有時(shí)為了特殊的分離或檢出需要,,要在固定相中加入某些添加劑,。
薄層板的活化:硅膠板于105-110℃烘30分鐘,氧化鋁板于150-160℃烘4小時(shí),,可得活性的薄層板,。
點(diǎn)樣
除另有規(guī)定外,用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上,,一般為圓點(diǎn),,點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm,樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜,。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
點(diǎn)樣直徑不超過(guò)5mm,,點(diǎn)樣距離一般為1~1.5cm即可,。
樣品在溶劑中的溶解度很大,原點(diǎn)將呈空心環(huán)--環(huán)形色譜效應(yīng)。因此配制樣品溶液時(shí)應(yīng)選擇對(duì)組分溶解度相對(duì)較小的溶劑,。
點(diǎn)樣方式有點(diǎn)狀點(diǎn)樣和帶狀點(diǎn)樣,。




以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于薄層色譜法(三)操作。
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