那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于凝膠成像系統(tǒng)基礎(chǔ)知識(一):
凝膠成像系統(tǒng)包括成像系統(tǒng)和分析凝膠圖片的軟件系統(tǒng),。我們在選購時(shí)需要分別從這兩個(gè)部分來考察凝膠成像系統(tǒng)的功能參數(shù)。
如果您主要用它來拍普通核酸膠或蛋白膠,,那么幾乎市場上所有的成像儀都可以很好的滿足您的需求,。這時(shí)除了價(jià)格這個(gè)決定因素外,,能比較的也就是一些操作是否簡便等不太重要的指標(biāo)了。
但是對于準(zhǔn)備做化學(xué)發(fā)光的用戶,,他們需要對敏感度要求高,,同時(shí)還要求比較寬的動態(tài)范圍。因?yàn)橐氩东@到微弱的化學(xué)發(fā)光,,需要上佳的CCD相機(jī)和鏡頭,。
一般來說,CCD相機(jī)的冷卻溫度和背景噪音息息相關(guān),,溫度越低,,噪音就越低。因此,,-25℃的優(yōu)良制冷溫度是對相機(jī)的**個(gè)要求(更低的溫度,,噪音降低效果不明顯,而量子效率又會受很大影響);另外,,較大的像素能夠提供更高的捕光效率;所以對于相同大小的CCD芯片,,需要注意像素的尺寸。
鏡頭的參數(shù)就簡單了,,由于我們只需要觀察近距離的樣品,,而且一般可以調(diào)整樣品位置(有些廠家甚至提供電動樣品升降平臺),所以基本無需選擇長鏡頭或者變焦鏡頭;但是,,由于我們需要檢測微弱的化學(xué)發(fā)光,鏡頭的光圈則至關(guān)重要,,一般F值越小,,其通光量越大,而且成平方反比關(guān)系,,因此我們一般需要選擇光圈F值盡量小的鏡頭,。另外,如果鏡頭是電動的,,我們可以省卻打開機(jī)箱,,反復(fù)手工調(diào)整光圈和聚焦等的煩惱。
其他我們需要考慮的包括光源,、濾光片和暗箱等部件,。光源的種類和發(fā)光的均一度,濾光片的數(shù)量和暗箱的遮光效果等均在我們的考慮范圍之內(nèi),。當(dāng)然,,一般如果成像儀的CCD和鏡頭配置不錯(cuò),一般這些部件也不會太差,。
在選擇凝膠成像系統(tǒng)時(shí),,我們關(guān)注的問題通常有以下一些方面:
1,、像素越高是不是成像更清晰,產(chǎn)品就越好?
像素是要針對成像設(shè)備來看的,,其實(shí)CCD本身的質(zhì)量比單純的像素高低更重要,。對于同級別CCD來說,重要的指標(biāo)是CCD的尺寸大小,,尺寸越大其本身價(jià)值就成幾何倍地增長,。
2. CCD和CMOS有什么區(qū)別,哪種芯片更好?
CCD和CMOS在制造上的主要區(qū)別是CCD是集成在半導(dǎo)體單晶材料上,,而CMOS是集成在被稱做金屬氧化物的半導(dǎo)體材料上,。
從原理上,CMOS的信號是以點(diǎn)為單位的電荷信號,,而CCD是以行為單位的電流信號,,前者更為敏感,速度也更快,,更為省電,。
但CCD制造工藝較復(fù)雜,采用CCD的攝像頭價(jià)格都會相對比較貴,。事實(shí)上經(jīng)過技術(shù)改造,,目前CCD和CMOS的實(shí)際效果的差距已經(jīng)減小了不少。而且CMOS的制造成本和功耗都要低于CCD不少,,所以很多攝像頭生產(chǎn)廠商采用的CMOS感光元件,。
在成像方面,相同像素下CCD的成像通透性,、明銳度都很好,,色彩還原、曝光可以保證基本準(zhǔn)確,。而CMOS的產(chǎn)品往往通透性一般,,對實(shí)物的色彩還原能力偏弱,曝光也都不太好,,由于自身物理特性的原因,,CMOS的成像質(zhì)量和CCD還是有一定距離的。但由于CMOS低廉的價(jià)格以及高度的整合性,,因此在攝像頭領(lǐng)域還是得到了廣泛的應(yīng)用,。
現(xiàn)在上等的CMOS并不比一般CCD差,但是CMOS工藝還不是十分成熟,,普通的CMOS 一般分辨率低而成像較差,。
目前的情況是,許多低檔入門型的數(shù)碼相機(jī)使用廉價(jià)的低檔CMOS芯片,成像質(zhì)量比較差,。普及型,、上等型及專業(yè)型數(shù)碼相機(jī)使用不同檔次的CCD,個(gè)別專業(yè)型或準(zhǔn)專業(yè)型數(shù)碼相機(jī)使用上等的CMOS芯片,。代表成像技術(shù)未來發(fā)展的X3芯片實(shí)際也是一種CMOS芯片,。
CCD與CMOS孰優(yōu)孰劣不能一概而論,但一般而言,,普及型的數(shù)碼相機(jī)中使用CCD芯片的成像質(zhì)量要好一些,。
3、如何看待CCD的一些主要技術(shù)參數(shù)?
CCD的主要技術(shù)參數(shù)有CCD尺寸,,有效像素,,信噪比,采集位數(shù)等,。其中CCD尺寸與信噪比都是影響成像的關(guān)鍵因素,,尺寸越大能接受的信號就越多。而熱噪音越低,,信噪比就越高,,成像質(zhì)量也就越好。采集位數(shù)指色彩灰度的表達(dá)范圍,。如采集位數(shù)為8則表示有2的8次方數(shù)量的灰度來還原色彩,。
4.什么是分辨率,它與像素值有什么關(guān)系?
分辨率的大小和像素值是分不開的,,像素值是指CCD能分辨到的*小的感光元件,,我們平時(shí)說的多少萬像素就是這些感光元件的個(gè)數(shù)了。
所以一般來講像素越多,,成像也就越清晰細(xì)膩,,當(dāng)然這其中還要受許多因素限制。但是高像素也不一定是好的CCD,,其原因就是像素大小(PixelSize),,也是很重要的因素,,相同數(shù)目的像素,,排列越密集,像素之間就越容易出現(xiàn)電流干擾,,容易出現(xiàn)"噪點(diǎn)"等干擾成像質(zhì)量的現(xiàn)象出現(xiàn),。由于制造工藝的限制,增加尺寸,,成本將會以幾何級數(shù)提高,。
現(xiàn)在大部分廠家的CCD為了提高圖像的靈敏度,會使用像素合并的技術(shù),,像素合并是一種非常有用的功能,,它可被用來提高像素的大小和靈敏度,。
5.什么是動態(tài)范圍值,它如何反映CCD的性能?
動態(tài)范圍決定著你能否同時(shí)在一張膠上同時(shí)看到強(qiáng)的信號和弱的信號,,而且他們之間能保持比較好的定量關(guān)系,。一般動態(tài)范圍采用數(shù)量級來表示,這個(gè)數(shù)越大,,表明動態(tài)范圍越寬,。
灰階表示一種表征光亮度的方法,12bit表示從*暗到*亮等分為212=4096個(gè)級別,,16bit即分為216個(gè)級別,,可見bit值越高能分出的細(xì)微差別越大。目前來說,,市場上主流的凝膠成像的CCD以12bit為主,,16bit的儀器一般情況下,分辨率均在200萬像素左右,,對于真正的16bit,,而像素值又近400萬的CCD是非常少見的。
簡單的說,,動態(tài)范圍表示在一個(gè)圖像中*亮與*暗的比值,。動態(tài)范圍的值越高CCD性能越好.
6. 為什么需要制冷CCD,它適用于哪些情況?
在曝光超過5-10秒時(shí),,CCD芯片就會發(fā)熱,,沒有致冷設(shè)備的芯片,“熱"或者白的像素點(diǎn)就會遮蓋圖像,,圖像到處可見雪花,。
在相同滿井電子的CCD情況下,降低CCD噪音,,就能提高CCD的監(jiān)測能力,,熱或者暗電流對于CCD都是噪音,噪音在制冷 CCD中基本都可以被深度致冷的Peltier消除,。
CCD結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),、數(shù)字化的方法等都會影響噪音的產(chǎn)生。當(dāng)然通過改善結(jié)構(gòu),、優(yōu)化方法,,同樣能減少噪音的產(chǎn)生。
制冷CCD的適用性:熒光及化學(xué)發(fā)光本身較弱,,所以對CCD噪音的降低要求很高,,應(yīng)選用高分辨率數(shù)字冷卻CCD相機(jī)結(jié)合高通透鏡頭系統(tǒng),使其能夠捕獲到信號其微弱的熒光及化學(xué)發(fā)光樣品圖像,并且能夠大程度的降低噪音,,減少背景,,提供出色的圖像清晰度。
另外可選激發(fā)光源及多位濾鏡輪擴(kuò)大了熒光/化學(xué)發(fā)光成像的應(yīng)用范圍,。所以一般在熒光及化學(xué)發(fā)光觀察時(shí)需要選擇制冷CCD,。所以制冷CCD相機(jī)優(yōu)良是優(yōu)異分子影像成像分析系統(tǒng)的未來的發(fā)展趨勢和必須要求。
7.什么是信噪比和暗電流,,它與CCD有什么關(guān)系?
提到制冷CCD ,我們就必須提到另外一個(gè)參數(shù)就是信噪比, 圖象的信噪比應(yīng)該等于信號與噪聲的功率譜之比;說到信噪比就不得不提到暗電流了,,因?yàn)榘惦娏魇菍?dǎo)致CCD噪音的很重要的因素。
暗電流指在沒有曝光的情況下,,在一定的時(shí)間內(nèi),,CCD傳感器中像素產(chǎn)生的電荷。我們在做化學(xué)發(fā)光檢測的時(shí)候,,需要的曝光的時(shí)候比較長,,這樣導(dǎo)致CCD產(chǎn)生較多的暗電流,對圖像的質(zhì)量影響非常大,。
通常情況下,,通過降低CCD的溫度來限度的減少暗電流對成像的影響。CCD產(chǎn)生的暗電流隨著溫度下降而減少,,但是在-23℃下曲線開始趨于平緩,,由此可以看出溫度并非需要無休止的降低的。所以在選擇冷CCD時(shí),,溫度在-25℃(優(yōu)良溫度,,非室溫以下)下一般就可以達(dá)到您的要求了。
有的CCD是在圖像生成后,,通過軟件去背景來扣除暗電流,,對于信號遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于背景的有一定效果,但是對于弱信號處理過程中會產(chǎn)生越來越多的錯(cuò)誤,。
8.什么是量子效率?
CCD的量子效率也稱像素靈敏度,,指在一定的曝光量下,像素勢阱中所積累的電荷數(shù)與入射到像素表面上的光子數(shù)之比。不同結(jié)構(gòu)的CCD其量子效率差異很大,。值得注意的是CCD的量子效率與入射光的波長有關(guān),。動態(tài)范圍的值越高CCD性能越好.
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)凝膠成像系統(tǒng)基礎(chǔ)知識(一)。
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