人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit

人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿,、組織,、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)的含量。

試劑盒工作原理

本試劑盒采用的是生物/素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定樣品中人皮質(zhì)酮/腎上腺酮水平,。向預先包被了人皮質(zhì)酮/腎上腺酮單克隆抗體的酶標孔中加入人皮質(zhì)酮/腎上腺酮,，溫育；溫育后,，加入生物/素標記的抗人皮質(zhì)酮/腎上腺酮抗體,。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復合物,，再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶,，然后加入底物A、B,，產(chǎn)生藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中人皮質(zhì)酮/腎上腺酮的濃度呈正相關(guān),。

實驗操作步驟

1. 從室溫平衡30min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.加樣：1）空白孔,，空白對照孔只加顯色劑A&B和終止液,。其余各步操作相同；2）標準品孔：加入標準品50ul,，鏈霉親和素-HRP50ul,；3）待測樣品孔：加入樣本40ul，然后各加入抗體10ul,、鏈霉親和素-HRP50ul,；

3.蓋上封板膜，輕輕震蕩混勻,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

4. 棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置30秒，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

5. 每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

6. 每孔加入終止液50μL,，10min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。

7.根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的回歸方程,，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,。也可以使用各種應用軟件來計算。