日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級會員 | 第17年

13917838824

當(dāng)前位置:首頁   >>   資料下載   >>   免疫組化SP法步驟

免疫組化SP法步驟

時間:2009-11-16閱讀:3179
分享:
  • 提供商

    上海聯(lián)碩生物科技有限公司
  • 資料大小

    0K
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    0次
  • 資料類型

    未傳
  • 瀏覽次數(shù)

    3179次

免疫組化SP法步驟

SP(streptavidin-perosidase)法,即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法.
按標(biāo)記物質(zhì)的種類,,如熒光染料,、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶),、鐵蛋白,、膠體金等,可分為免疫熒光法,、放射免疫法,、酶標(biāo)法和免疫金銀法等。按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步,、三步或多步法),;按結(jié)合方式可分為抗原—抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)法和親和連接,,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法,、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是zui常使用的方法,。
一般的sp法步驟啊,具體如下:
1.烤片,,68℃,20分鐘,
2. 常規(guī)二甲苯脫蠟,,梯度酒精脫水,;二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I(xiàn) 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min
3.阻斷 滅活內(nèi)源性過氧化物酶:3%H2O2 37℃孵育10min,,PBS沖洗3X5min;
4. 抗原修復(fù):置0.01M枸櫞酸緩沖液(PH 6.0)中用煮沸(95℃,,15-20min),,自然冷卻20min 以上,再用冷水沖洗缸子,,加快冷卻至室溫,,PBS沖洗3X5min。
5. 正常羊血清工作液封閉,,37℃10 min,,傾去勿洗.
6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育過夜,PBS沖洗3X5min(用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照),;
滴加生物素標(biāo)記二抗, 37℃孵育30min, PBS沖洗3X5min;
7. 滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素卵白素工作液,,37℃孵育30min, PBS沖洗3X5min;
8. DAB/ H2O2反應(yīng)染色,自來水充分沖洗后,,
蘇木素復(fù)染,,常規(guī)脫水,透明,,干燥,,封片。


 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功,!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言