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當(dāng)前位置:上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>TRIZOL法如何提取細(xì)胞中的總RNA
RIZOL是一種總RNA抽提試劑,,TRIZOL在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性,是最常見(jiàn)的RNA提取方法之一,。
實(shí)驗(yàn)試劑及原理:
(1)TRIZOL含有苯酚,、異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶,。
TRIZOL的主要成分是苯酚,。
TRIZOL在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性,,因此常用于對(duì)純化RNA及標(biāo)準(zhǔn)化RNA的生產(chǎn)。
(2)氯仿:
其作為有機(jī)溶劑可以快速破壞細(xì)胞,、使內(nèi)容物釋放,、去除勻漿中的脂溶性雜質(zhì);
可以抑制RNA酶的活性,,并使蛋白質(zhì)變性,,易于通過(guò)離心去除。
(3)異丙醇:
用于增加RNA局部密度,,作為RNA的沉淀劑,。
75%乙醇:有機(jī)溶劑,無(wú)脫水作用且揮發(fā)性好,、通過(guò)相似相溶的原理達(dá)到洗滌RNA沉淀的作用,。
(4)DEPC水:
不含雜質(zhì)和RNA酶,作為RNA溶解的溶劑,。
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