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電泳緩沖液有何作用,?

時間:2024/7/15閱讀:490
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電泳緩沖液是核酸,、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成, 是電泳場中的導(dǎo)體,也是維持電泳系統(tǒng)恒定 pH值的必要條件,。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE,、TBE,、TPE和MOPS等。

電泳緩沖液的作用:
1.緩沖液在電泳過程中的一個作用是維持合適的pH,。電泳時陽極與陰極都會發(fā)生電解反應(yīng),,陽極發(fā)生的是氧化反應(yīng)(4OH--4e->2H2O+O2),陰極發(fā)生的是還原反應(yīng)(4H++4e->2H2),,長時間的電泳將使陽極變酸,陰極變堿,。一個好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本不變,。

2.電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導(dǎo)電性,,以利于DNA分子的遷移,例如,,一般電泳緩沖液中應(yīng)含有0.01-0.04mol/L的Na+離子,,Na+離子的濃度太低時電泳速度變慢;太高時就會造成過大的電流使膠發(fā)熱甚至熔化。

3.電泳緩沖液還有一個組分是EDTA,,加入濃度為1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等離子,,防止電泳時激活 DNA酶,,此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀,。

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