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操作步驟
1,、冰凍制片組織常規(guī)取材。
2,、取材后的組織材塊用干擦布或吸水紙充分吸干表面水分,。
3、在冷凍切片機里預(yù)冷的組織托上滴加冷凍切片組織包埋劑,。
4,、待包埋劑底部變白后放上組織材塊,。
5、迅速放上冷凍錘(低于-25℃),，待組織與包埋劑冷凍凝固后取下冷凍錘,。
6、將組織托夾入切片夾頭,，進行切片,。
7、切片完成后可將組織托置于室溫下 3-5 分鐘解凍后變軟,，用水將包埋劑沖洗干凈,。
8、將組織放入包埋盒,，浸入中性緩沖福爾馬林固定液中進行組織固定,。
結(jié)果
1、包埋效果良好:包埋劑均勻圍繞組織,，冷凍后包埋劑和組織變白,，硬度適宜，切片平整,。
2,、包埋效果不良:包埋劑過多導致溢出組織托外圍、包埋劑過少不能有效支撐組織或冷凍錘溫度不夠低導致冷凍速度過慢引起組織偏軟,，不能切片,。
注意
1、冷凍切片組織包埋劑到達最佳切片硬度所要求的溫度區(qū)間為-10℃ - -30℃,，溫度過高質(zhì)軟不能切片,，溫度過低切片會出現(xiàn)碎裂現(xiàn)象。
2,、組織脫水前需要將組織表面殘留的冷凍切片組織包埋劑充分洗凈,，避免包埋劑進入脫水流程。
3,、冷凍切片貼片固定后不水洗就進入蘇木素染色流程,，切片中殘留包埋劑將會與蘇木素染色液結(jié)合，出現(xiàn)非特異性蘇木素染色,。
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