細胞免疫熒光的詳細操作步驟

時間：2023/6/20閱讀：680

免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術(shù),，是標記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種,。它是在免疫學(xué),、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù),。很早以來就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,，利用抗原抗體反應(yīng)進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位,。

1,、取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養(yǎng)皿里，PBS洗三遍,。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,，因此夾取的時候要小心。
2,、4%多聚甲Q固定20分鐘,，PBS洗三遍。
3、0.2%Triton X 100通透10分鐘,，PBS洗三遍,。
4、與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,，PBS洗三遍,。
5、一抗4度濕盒內(nèi)過夜,，也可37度2小時,，感覺前者效果好，PBS洗三遍,。
6,、二抗室溫2小時，或者37度1半小時,，PBS洗三遍,。
7、最好用DAPI染核,，然后直接照熒光片,。
8、蒸餾水洗掉PBS,，甘油封片,，指甲油封片子的四周。

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