蛋白質(zhì)變性劑是一類能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性作用的試劑,。蛋白質(zhì)變性是指當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)受物理或化學(xué)因素的影響,，其分子內(nèi)部原有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)發(fā)生改變的過程。一般認(rèn)為蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)有了改變或遭到破壞，都是變性的結(jié)果,。

常見的蛋白質(zhì)變性劑有強(qiáng)酸,、強(qiáng)堿、重金屬鹽,、丙酮,、尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍等,。在生化實驗中,，常需要對蛋白質(zhì)進(jìn)行變性研究，一般我們常用尿素,、鹽酸胍和異硫氰酸胍這三種蛋白質(zhì)變性劑,。今天我們就來講講這三種蛋白質(zhì)變性劑的優(yōu)缺點、區(qū)別,、變性機(jī)制和注意事項等內(nèi)容,。

尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍的優(yōu)缺點：

尿素的溶解能力和變性能力相對較弱,，但具有不電離,、呈中性、成本低,、蛋白質(zhì)復(fù)性后不會造成大量蛋白質(zhì)沉淀等優(yōu)點,。

鹽酸胍的溶解能力和變性能力相對較強(qiáng)，但成本比尿素高,、在酸性條件下易產(chǎn)生沉淀,、可能對蛋白質(zhì)離子交換色譜有干擾等缺點。

異硫氰酸胍的溶解能力和變性能力是這三種蛋白質(zhì)變性劑中強(qiáng)的,，同時也是最貴的,。

尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍的區(qū)別：

濃度：在室溫下,，4~6mol/L尿素和3~4mol/L鹽酸胍,，可使球狀蛋白質(zhì)從天然狀態(tài)轉(zhuǎn)變至變性狀態(tài)的中點，通常增加變性劑濃度可提高變性程度,，一般來說8mol/L尿素和6mol/L鹽酸胍可以使蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樽冃誀顟B(tài),。不過也有一些球狀蛋白質(zhì)，甚至在8mol/L尿素和6mol/L鹽酸胍溶液中也不能變性,，然而繼續(xù)提高溶液濃度,，在8mol/L鹽酸胍溶液中，蛋白質(zhì)一般以無規(guī)則卷曲（變性）構(gòu)象狀態(tài)存在,。

溶解度：尿素溶解能力較鹽酸胍慢而弱,，鹽酸胍溶解能力較異硫氰酸胍慢而弱。尿素的溶解度為70%~90%，它在作用時間較長或溫度較高時會裂解形成氰酸鹽,，對重組蛋白質(zhì)的氨基進(jìn)行共價修飾,；鹽酸胍溶解能力達(dá)95%以上，且溶解作用快而不造成重組蛋白質(zhì)的共價修飾,。