酶標板作為ELISA檢測實驗中的輔材,，起著舉足輕重的作用并直接影響最終實驗結果,，酶標板的好壞主要取決于其對蛋白吸附的靈敏度,、板孔間蛋白吸附能力差異以及所采購酶標板批次間的差異,。因此，選擇一款蛋白吸附靈敏度高,、對蛋白吸附能力孔間差異小,、批次間差異小的酶標板產品，是實驗者獲得可靠,、穩(wěn)定實驗結果的保障,。
酶標板分類：根據(jù)不同的分類標準，酶標板有著不同的分類,。

一,、根據(jù)孔數(shù)，可分為96孔,、48孔等，由于酶標板主要是配合酶標儀用,，目前市面上的酶標儀最多為96孔,，因此酶標板最為常用的也是96孔。

二,、根據(jù)其底部的不同,，又分為平底的，U型底,、V型底等,。平底的折射率低，適于在酶標儀檢測,；U型底的酶標板折射率較高,，方便加樣,、吸樣、混勻等操作,，可以不用放在酶標儀上,，直接通過目測觀察顏色變化情況，從而判定有無相應的免疫反應,。V底的酶標板可以精確的吸取樣品,。

三、根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同,，又分為高結合力,、中結合力和氨基化等。

1） 高結合力
此種酶標板,，表面經處理后,，其蛋白結合能力大大增強，可達300~400ng IgG/cm2,，主要結合的蛋白分子量＞10kD,。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,，不足之處為較易產生非特異性反應,。抗原或抗體包被后,，以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,，需使用蛋白作為封閉劑。

（2) 中結合力
此類酶標板經表面疏水鍵被動與蛋白結合,，適合作為分子量＞20kD的大分子蛋白的固相載體,，其蛋白結合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,，可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液,。

（3)氨基化
這種酶標板經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,，其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體,。使用合適的緩沖液和pH值,，其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結合的能力,，可用于固定溶于Triton-100,、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,，一部分蛋白分子無法結合,；此外,，其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,，使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用,。

四、根據(jù)顏色可分為透明,、黑色,、白色。
透明的是常用的,，用于最一般的酶聯(lián)免疫實驗,。相對于透明的的酶標板，還有用于發(fā)光檢測用的不透明的酶標板,，一般有黑色和白色兩種,。黑色的酶標板自身會有光吸收，所以它的信號相對于白色酶標板要低很多,，因此一般用于檢測較強的光,，如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測,，常用于一般的化學發(fā)光,。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應帶來的問題。同時需要注意的是,，用一般的酶標板不可以進行發(fā)光檢測,，因為一般從化學發(fā)光反應中發(fā)射出的光是各向同性，如果用透明的酶標板,，光不僅會從垂直方向發(fā)散,，還會從水平方向發(fā)散，使得光極易通過各個孔之間的間隙和孔壁,，從而導致各孔的光吸收值受到相鄰孔發(fā)射光的影響,。

酶標板性能判斷

良好的酶標板應該是吸附性能好，空白值低,，孔底透明度高,，各板之間、同一板各孔之間性能相近,。酶標板由于原料的不同和制作工藝的差別，各種產品的質量差異很大,，因此,，每一批號的酶標板在使用前須事先檢查其性能。

常用的檢查方法為：以一定濃度的人IgG（一般為10ng/ml）包被ELISA板各孔,，洗滌后每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,，保溫后洗滌,，加底物顯色，終止酶反應后,，分別測每孔溶液的吸光度,。控制反應條件,，使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右,。計算全部讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,，應小于10%,。以下以A、B,、C三款酶標板為例,。
直接法：檢測Human IgG在酶標板表面的吸附
雙抗體夾心法：包被山羊抗人抗體檢測陽性血清中抗原

由上圖可以看出，這三類酶標板中,，A類酶標板具有更好的蛋白吸附效果,，同時也提高蛋白吸附的靈敏度，能夠提供更為可靠的實驗數(shù)據(jù),。

另外,，可以詢問酶標板的批內差異，以下是某款酶標板的批內差異,。
由批內差異數(shù)據(jù)圖可以看出,，該酶標板具有很好地批間穩(wěn)定性，批內變異系數(shù)（CV）差異均在5.0％附近,，明顯低于業(yè)內關于臨床免疫反應用酶標板的質量控制標準中批內變異系數(shù)低于10.0%的要求,，因此也適合用于ELISA實驗。