1、細(xì)胞培養(yǎng)用液：除培養(yǎng)基,、血清,、谷氨酰胺外，其他幾種液體也屬必須,，不可省略：

（1）雙抗：200倍,，（1ml/支）其終濃度為青霉素100U/ml；鏈霉素100ug/ml,，-24度保存,。  

（2）L-谷氨酰胺：100倍，（1ml/支）,， 終濃度2mM,，-24度保存。  

（3）丙酮酸鈉：配制濃度50mM,，4ml/支,，終濃度為1mM/ml， -24度保存,。  

（4）Hepes液：配制濃度1M（5ml/支）,，一支Hepes加入到200ml  *培養(yǎng)基中,，終濃度為25mM/ml,，常溫保存,。

2、液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,，及使用方法,。

幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),，在缺少谷氨酰胺時(shí),，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以,，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20度冰凍保存,，用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 度 冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)，應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺,。

3,、培養(yǎng)用液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

由于，大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,，偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響,。各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差,，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng),。

但總體來(lái)說(shuō)，細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,，偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長(zhǎng),。因此，我們?cè)谂渲婆囵B(yǎng)用液時(shí),，可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些,。液體在經(jīng)過(guò)0.10um或0.22um濾膜過(guò)濾時(shí)，溶液的PH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右,。

4,、液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好,？

要冷藏,，因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)，其溶液的PH值會(huì)發(fā)生改變,，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 1年,。