養(yǎng)細(xì)胞的人怕的就是細(xì)胞污染,，細(xì)胞一污染，一夜回到解放前,，一切都得從頭開始,，尤其是新手小白，幾乎都逃不過細(xì)胞污染,，避免細(xì)胞污染,，重要的是操作前和操作時(shí)。

1.  操作前,，要保證所有的用品無菌,，移液槍槍頭、離心管,、培養(yǎng)瓶,、PBS、培養(yǎng)基,、血清等,。     高壓滅菌，一般要提前一天高壓滅菌，滅菌結(jié)束后放烘箱烘干,，為確保充分烘干,，一般需要過夜。要確保一定被高壓過,，像我們實(shí)驗(yàn)室就發(fā)生過沒被高壓的槍頭盒放烘箱里了,，從高壓鍋里拿瓶子時(shí)一定要擰緊瓶蓋，否則就白壓了,。

2.操作前紫外燈照射超凈臺(tái)20min左右,。實(shí)驗(yàn)前打開超凈臺(tái)的通風(fēng)，用酒精棉球?qū)⑴_(tái)面擦一遍,，所有進(jìn)入超凈臺(tái)的東西都要噴酒精,。  

3.操作時(shí)，所有的玻璃瓶打開前都需在酒精燈上烤一圈,，畢竟“病從口入”嘛,，將瓶蓋放在左側(cè)（清潔區(qū)），保證操作時(shí)不會(huì)從上方經(jīng)過,。

4.操作時(shí)注意槍頭,，做到懸空加樣，尤其是給非無菌的離心管里加?xùn)|西,，給含有細(xì)胞的皿里加?xùn)|西，如你從玻璃瓶里給一個(gè)含有細(xì)胞的培養(yǎng)皿里加培養(yǎng)基,，那么你的槍頭就不能伸到培養(yǎng)皿的液體里,，否則你的培養(yǎng)基就污染了，除非你每次換槍頭,。  

5.注意袖口,，胳膊，切記不要從打開的瓶,，皿上面越過,，防止落菌。

6.手拿所有的蓋子時(shí),，一定不要碰到里面,。

7.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用酒精燈燒所有的瓶口,、蓋子,，擰緊，用封口膜封好,，我們的封口膜一般是提前剪好泡在含有酒精的瓶子里,。     一般細(xì)胞污染分為細(xì)菌、真菌、支原體,，支原體在顯微鏡下肉眼看不到,，底下圖一為細(xì)菌污染，圖二為真菌-念珠菌污染

細(xì)菌污染有時(shí)和細(xì)胞碎片不容易區(qū)別,，在高倍鏡下都會(huì)看到黑色小點(diǎn)在做布朗運(yùn)動(dòng),，但是細(xì)胞碎片大小不一，培養(yǎng)基清澈透亮,，而細(xì)菌污染的黑點(diǎn)大小差不多,，培養(yǎng)基渾濁，有泥沙感