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介紹:CCK-8試劑中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 *(1-Methoxy PMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan),。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量,。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測,、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選,、細(xì)胞增殖試驗(yàn),、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及藥敏試驗(yàn)等。
優(yōu)點(diǎn):
1,、使用方便,,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑,;
2,、檢測快速;
3,、靈敏度高,,甚至可以測定較低細(xì)胞密度;
4,、重復(fù)性優(yōu)于MTT,;
5、對細(xì)胞毒性??;
6、為1瓶溶液,,毋需預(yù)制,,即開即用
CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點(diǎn):
★靈敏度高,,數(shù)據(jù)可靠,,重現(xiàn)性好
★操作簡便,省時(shí)省力
★水溶性,,不需要換液,,尤其適合于懸浮細(xì)胞
★無需放射性同位素和有機(jī)溶劑,對細(xì)胞毒性低
★為1瓶溶液,毋需預(yù)制,,即開即用
★適合于高通量藥物篩選
CCK-8用途:藥物篩選,、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定,、腫瘤藥敏試驗(yàn)
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