紫外可見分光光度計簡介1852年,,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,提出了分光光度的基本定律,,即液層厚度相等時,,顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎,,這就是的比爾朗伯定律,。1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應用于定量分析化學領域,,并且設計了*臺比色計,。到1918年,美國國家標準局制成了*臺紫外可見分光光度計,。此后,,紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進,又出現(xiàn)自動記錄,、自動打印,、數(shù)字顯示、微機控制等各種類型的儀器,,使光度法的靈敏度和準確度也不斷提高,,其應用范圍也不斷擴大。
]從儀器理論上講,,各種紫外可見分光光度計,,都是根據(jù)比耳定律設計的;而比耳定律研究的是在平行光,、單色光的條件下,,物質對光的吸收。但是,,紫外可見分光光度計的單色器不可能得到真正的單色光,。并且,單色器系統(tǒng)不同,,它產(chǎn)生的單色光的純度(光譜帶寬)也不同,,并且光通過物質時,也不可能是真正的平行光,。因此,,嚴格地說,實際工作中,,任何紫外可見分光光度計,,都不可能真正滿足比耳定律。所以,,紫外可見分光光度計都是針對近似平行光,、近似單色光的條件設計的。所以,,就看誰設計,、制造儀器zui能滿足或接近比耳定律(或產(chǎn)生的比耳定律的偏離zui小),誰的儀器到了使用者手里,,由于非平行光或非單色光產(chǎn)生的分析誤差zui小,,誰的儀器就(當然還有雜散光、噪聲,、穩(wěn)定性等要求),。這就是從儀器學理論,去看紫外可見分光光度計的設計,、制造誤差的zui根本,、zui本質的問題;也是使用者從儀器學理論去看紫外可見分光光度計的分析誤差的zui根本,、zui本質的問題
紫外可見分光光度計主要應用
1檢定物質
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,,特別是zui大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用,。在國內(nèi)外的藥典中,,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的zui大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段,。
2與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質,,則兩者的光譜圖應*一致,。如果沒有標樣,也可以和現(xiàn)成的標準譜圖對照進行比較,。這種方法要求儀器準確,,精密度高,且測定條件要相同,。
3比較zui大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
4純度檢驗
5推測化合物的分子結構
6氫鍵強度的測定
實驗證明,,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,,以確定選擇哪一種溶劑,。
7絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
8反應動力學研究
9在有機分析中的應用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學,,它是在有機化學和分析化學的基礎上發(fā)展起來的綜合性學科,。