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紫外吸收法測定蛋白質(zhì)濃度的基本原理及優(yōu)缺點(diǎn)

時(shí)間:2022-6-29閱讀:11405
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原理:蛋白質(zhì)分子中常含有酪氨酸,、色氨酸,、苯丙氨酸等苯環(huán)結(jié)構(gòu),,在紫外280nm波長處有最大吸收峰,,其光吸收值與蛋白質(zhì)濃度成正比,,故可以用280nm波長吸收值大小來測定蛋白質(zhì)含量。
優(yōu)點(diǎn):
1.快速,;
2.對(duì)蛋白質(zhì)無破壞性,。
缺點(diǎn):
1.不是嚴(yán)格的定量方法。因?yàn)榇朔ㄊ歉鶕?jù)酪氨酸(Tyr),、苯丙氨酸(Phe),、色氨酸(Trp)殘基的強(qiáng)吸收值來測定的,不同的蛋白質(zhì)具有不同的消光系數(shù),。另外,,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)分子中不含Tyr、Phe或Trp殘基時(shí),,該方法就不能檢出蛋白,。(此法用于測粗提總蛋白濃度較為適宜)
2.核酸可引起強(qiáng)烈干擾。


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