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光吸收遵循的是比爾-朗伯定律(Beer–Lambert law),,吸光度=吸光系數(shù)*吸收介質(zhì)的厚度*吸收介質(zhì)的濃度 即A=abc,其中A為吸光度,,a為吸光系數(shù),,b為厚度,c為樣品的濃度,。影響吸光度的因數(shù)是b和c,。a是與溶質(zhì)有關(guān)的一個常量。
同時,,因為儀器都有一個測量上限,,很多時候溶液都需要進(jìn)行稀釋。理論上如果都在測量范圍內(nèi),,稀釋也沒有操作錯誤,,根據(jù)不同稀釋倍數(shù)測試出來的原液結(jié)果應(yīng)該都是一樣的。
當(dāng)一束光通過一個吸光物質(zhì)(通常為溶液)時,,溶質(zhì)吸收了光能,,光的強(qiáng)度減弱。吸光度就是用來衡量光被吸收程度的一個物理量,。吸光度用A表示,。A=abc,其中a為吸光系數(shù),,單位L/(g·cm),,b為光在樣本中經(jīng)過的距離(通常為比色皿的厚度),單位cm,,c為溶液濃度,,單位g/L。A=Ecl,。
濃度使吸光度變化的原理:
符號A,表示物質(zhì)對光的吸收程度,。lg(I0/I1)式中I0是通過均勻的液體介質(zhì)的一束平行光的入射光的強(qiáng)度,;It是透射光強(qiáng)度;T是透射比,。A值越大,,表示物質(zhì)對光的吸收越大。
根據(jù)比爾定律,,吸光度與吸光物質(zhì)的量濃度c成正比,,以A對c作圖,可得到光度分析的校準(zhǔn)曲線,。在多組分體系中,,如果各組分的吸光質(zhì)點彼此不發(fā)生作用,那么吸光度便等于各組分吸光度之和,這一規(guī)律稱吸光度的加和性,。
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