定量測試定律俗稱朗伯-比爾定律，其成立條件是待測物為均一的稀溶液,、氣體等,，無溶質(zhì)、溶劑及懸濁物引起的散射,；入射光為單色平行光,。那么引起朗伯-比爾定律不成立的也基本是上述原因所致。

1,、高濃度引起的朗伯-比爾定律的不成立

當(dāng)吸收物質(zhì)濃度很高時,，吸收質(zhì)點距離很近，會互相影響對方的電荷分布,，使吸收質(zhì)點對某一特定波長光的吸收能力改變,，從而引起定律不成立。在有些情況下當(dāng)濃度很大時，會引起折射率的變化,，也會是定律不成立,。同樣在溶液濃度很高時，質(zhì)點距離很近,，會引起輻射和吸收的重疊,，從而降低整體的吸收能力，使定律不成立,。

2,、非單色光引起朗伯-比爾定律的不成立

就目前國內(nèi)外分光光度計制造而言，不可能制造出能夠分出單色光的光度計,，由單色器分光后的光并非純粹的銳線光,，而是有一定寬度的光譜。光經(jīng)過樣品后,，非特定波長的光被吸收的很少,，進(jìn)入檢測器，由光信號轉(zhuǎn)為電信號,，得出數(shù)據(jù),，如果儀器的光譜帶寬過大會使定律不成立。

3,、雜散光過大引起朗伯-比爾定律的不成立

在測試低濃度樣品時,，看不出雜光對結(jié)果的影響，但是當(dāng)測試高濃度樣品時,，雜光對測試結(jié)果的影響就很大了,。例如：當(dāng)測試有一定濃度的樣品時，其透過率為：3%,，若儀器的雜散光是：0.5%,，無疑這對數(shù)據(jù)結(jié)果影響是很大的。所以雜散光過大會使定律不成立,。

4,、懸濁液和混濁液使朗伯-比爾定律不成立

因為質(zhì)點在測試容器中會不停的運(yùn)動，因為懸濁液或混濁液的質(zhì)點體積比較大,，會直接影響測試結(jié)果的不穩(wěn)定,，當(dāng)質(zhì)點運(yùn)動到光射的位置會使透過率變小、吸光度變大,，無法讀出一個準(zhǔn)確的值,，自然使定律不成立。

5,、非平行光使定律不成立

目前國內(nèi)外儀器所采用的光源都是發(fā)散式的,，需經(jīng)過透鏡或凹面鏡聚焦，絕大部分儀器經(jīng)過樣品池時都不是平行的，這樣會引起光的復(fù)雜變化,，使讀數(shù)不準(zhǔn)確，定律不成立,。

其它還有很多因素會使定律不成立,，如：膠態(tài)溶液、光度精度和散射的影響等,，在此僅提供以上主要因素引起的定律不成立的簡單介紹,，僅供參考。