液相色譜儀使用及工作原理
工作原理:
流動相通過輸液泵流經(jīng)進樣閥,,與樣品溶液混合,,流經(jīng)色譜柱,在色譜柱中進行吸附,、分離,,后每一組分分別經(jīng)過檢測器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娪嵦枺谏V工作站上出現(xiàn)相應(yīng)的樣品峰,。
液相色譜的使用:
首先對樣品進行預(yù)處理,然后進樣,,進樣完畢后,,清洗進樣口,每次分析結(jié)束后,,清洗通道,,后關(guān)閉儀器。擴展資料:
液相色譜所用基本概念:保留值,、塔板數(shù),、塔板高度、分離度,、選擇性等與氣相色譜一致,。液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,但由于在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相,,而液體和氣體的性質(zhì)不相同,。
此外,液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同,,所以,,液相色譜與氣相色譜有一定的差別。
主要有以下幾力‘面:
①操作條件及應(yīng)用范圍不同
對于氣相色譜,,是加溫操作,。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質(zhì),對高沸點化合物,、非揮發(fā)性物質(zhì),、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離,、分析較為困難,,致使其應(yīng)用受到一定程度的限制,據(jù)統(tǒng)計只有大約20%的機物能用氣相色譜分析,。
而液相色譜是常溫操作,,不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制,它非常適合相對分子量較大,難汽化,,不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì),、離子型化合物和高聚物的分離分析,大約占有機物的70%~80%,。
②液相色譜能完成難度較高的分離工作
a.氣相色譜的流動相載氣是色譜惰性的,,基本不參與分配平衡過程,與樣品分子無親和作用,,樣品分子主要與固定相相互作用,。而在液相色譜中流動相液體也與固定相爭奪樣品分子,為提高選擇性增加了一個因素,。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動相,,增加分離的選擇性。
b.液相色譜固定相類型多,,如離子交換色譜和排阻色譜等,,作為分析時,選擇余地大,;而氣相色譜并不可能,。
c.液相色譜通常在室溫下操作,較低的溫度,,一般有利于色譜分離條件的選擇,。
③由于液體的擴散性比氣體的小105倍,因此,,溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢,,柱外效應(yīng)就顯得特別重要;而在氣相色譜中,,由色譜柱外區(qū)域引起的擴張可以忽略不計,。
④液相色譜中,制備樣品簡單,,回收樣品也比較容易,,而且回收是定量的,適合于大量制備,,但液相色譜尚缺乏通用的檢測器,,一起比較復(fù)雜,價格昂貴,。在實際應(yīng)用中,,這兩種技術(shù)是相互補充的。
綜上所述,,液相色譜具有柱效高,,選擇性高,,靈敏性高,分析速度快,,重復(fù)性好,,應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點,該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一,。目前在化學(xué),,化工,醫(yī)藥,,生化,,環(huán)保,農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用,。
液相色譜應(yīng)用非常廣泛,,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。
(1)分離混合物
液相色譜法只要求樣品能制成溶液,,不受樣品揮發(fā)性的限制,,流動相可選擇的范圍寬,,固定相的種類繁多,,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì),。
通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,,液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),,能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分,。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離,。
(2)生化分析
由于液相色譜法具有高分辨率,、高靈敏度、速度快,、色譜柱可反復(fù)利用,,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué),、食品分析,、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析,、無機分析等各種領(lǐng)域,,并已成為解決生化分析問題有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用
液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向,。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等:液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。