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凱氏定氮法工作原理及應(yīng)用分析

閱讀:28626      發(fā)布時間:2018-1-8
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1,、原理
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,,用濃硫酸硝化樣品將有機氮都轉(zhuǎn)變成無機銨鹽,,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收,,再以標準酸滴定,,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,,可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量,,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。


2,、缺陷
從凱氏定氮原理可以知道:凱氏定氮法是將含氮有機物轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機氮硫酸銨來進行檢測,,以得到含氮量的測定值乘以一定系數(shù)得出蛋白質(zhì)含量。而含氮有機物不僅僅是蛋白質(zhì),,還有三聚氰胺等等,。在加上食品中蛋白質(zhì)含量的現(xiàn)行國家標準和通行測定方法是經(jīng)典凱氏定氮法,這就為造假者提供了可乘之機,。蛋白質(zhì)中的含氮量不超過30%,,三聚氰胺的zui大的特點是含氮量很高(66%),,溶于水后無色無味,也就是說在一杯清水中加入三聚氰胺,,然后用凱氏定氮法檢測,,結(jié)果顯示是含有蛋白質(zhì)的。由于“凱氏定氮法”只能測出含氮量,并不能鑒定飼料中有無違規(guī)化學(xué)物質(zhì),所以,添加三聚氰胺的奶粉理論上可以測出較高的蛋白質(zhì)含量,。

3,、應(yīng)用
凱氏定氮法的普遍適用性、性和可重復(fù)性已經(jīng)得到了的廣泛認可,。它已經(jīng)被確定為檢測食品中蛋白質(zhì)含量的標準方法,。但是,這種方法并不能給出真實的蛋白質(zhì)含量,,因為所測定的氮可能不僅僅是由蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化來的,。這可以從2007年美國寵物食品污染事件和2008年中國毒奶粉事件等食品安全事件中被體現(xiàn):三聚氰胺,一種含氮量較高的物質(zhì),,被添加到了食品中以偽造較高的含氮量,。另外,由于不同的氨基酸序列,,這種方法也需要許多不同的校正因子,。而且,凱氏定氮法還需要使用濃硫酸和較長時間的加熱(一般來講,,大于1小時),。這也造成了在粗略測量蛋白質(zhì)含量時,杜馬斯法有時更方便些,。

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