定氮儀是利用凱氏定氮法對物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量進行測定的儀器,。定氮儀按其配置分,，可以分為全自動凱氏定氮儀和半自動定氮儀。其中全自動凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置,。定氮儀操作時可以分為人工模式和自動模式,，不同的實驗者，可以根據(jù)對實驗操作的熟練程度,，自由選擇哪種方式,。一般的，新手我們推薦使用自動模式,，可以為你省去很多的步驟,。目前，定氮儀已經(jīng)廣泛使用于測定乳核乳制品中蛋白質(zhì)的測定,。
下面我們主要介紹下,，我們在使用定氮儀測定蛋白質(zhì)含量時，如何清洗定氮儀,。
儀器安裝前,，定氮儀各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈，所用橡皮管,、塞須浸在10%NaOH溶液中,，煮約10min，水洗,、水煮10min,，再水洗數(shù)次,，然后安裝并固定在一只鐵架臺上。
儀器使用前,，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌,，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨，正在使用的定氮儀,，每次測樣前,，蒸氣洗滌5min即可。較長時間未使用的儀器,，重復蒸氣洗滌,，不得少于三次，并檢查儀器是否正常,。仔細檢查各個連接處,，保證不漏氣。這樣,，一方面保證了儀器的清潔,，另一方面，也同時對儀器進行了檢查,，一些壞的零部件,，可以及時被查出并替換。
定氮儀安裝完后,，我們需具體對儀器的內(nèi)部進行清潔,。首先在定氮儀蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性,，以避免水中的氨被蒸出而影響結(jié)果,，并放入少許沸石（或毛細管等），以防爆沸,。這個步驟有點類似于凱氏定氮法的消化前步驟,，用相應的試劑對其進行清洗。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應室,，但玻杯內(nèi)的水不要放光,，塞上棒狀玻塞，保持水封,，防止漏氣,。這一步可直接驗證插管是否可以使用。蒸氣發(fā)生后,，立即關(guān)閉廢液排放管上的開關(guān),，使蒸氣只能進入反應室，導致反應室內(nèi)的水迅速沸騰，蒸出蒸氣由反應室上端口通過定氮球進入冷凝管冷卻,，在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水,。從定氮球發(fā)燙開始計時，連續(xù)蒸煮5min,，然后移開煤氣燈,。沖洗完畢，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管,，由于氣體冷卻壓力降低,，反應室內(nèi)廢液自動抽到反應室外殼中，打開廢液排出口夾子放出廢液,。整個清洗過程,，到這里就結(jié)束了，經(jīng)過清洗這個過程,，定氮儀內(nèi)部環(huán)境已經(jīng)符合我們測定蛋白質(zhì)含量的需求,，另外，定氮儀的各部件也得到了檢驗,，可以及時更換漏氣或者其他壞了的部分,。根據(jù)以上步驟重復清洗2～3次，再在冷凝管下?lián)Q放一個盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口*浸沒在溶液中,，蒸餾1～2min,，觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色,。如不變色,，表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈。移去錐形瓶,，再蒸餾1～2min,，用蒸餾水沖洗冷凝器下口，關(guān)閉煤氣燈,，定氮儀即可供測樣品使用,。
這樣，凱氏定氮儀整個清洗過程就結(jié)束了,。凱氏定氮儀在測定蛋白質(zhì)含量前,，一般都需要經(jīng)過清洗，這樣對于測定結(jié)果,，會更加,。另外，也可以保證實驗室人員的安全,，因為在清洗過程中,，對儀器進行了檢查，排除了因為儀器的故障而造成了危險,。
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