定氮儀是利用凱氏定氮法對物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量進行測定的儀器。定氮儀按其配置分,，可以分為全自動凱氏定氮儀和半自動定氮儀,。其中全自動凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置。定氮儀操作時可以分為人工模式和自動模式,，不同的實驗者,，可以根據(jù)對實驗操作的熟練程度,，自由選擇哪種方式,。一般的，新手我們推薦使用自動模式,，可以為你省去很多的步驟,。目前，定氮儀已經(jīng)廣泛使用于測定乳核乳制品中蛋白質(zhì)的測定,。
下面我們主要介紹下,，我們在使用定氮儀測定蛋白質(zhì)含量時，如何清洗定氮儀,。
儀器安裝前,，定氮儀各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈，所用橡皮管,、塞須浸在10%NaOH溶液中,，煮約10min，水洗,、水煮10min,，再水洗數(shù)次，然后安裝并固定在一只鐵架臺上,。
儀器使用前,，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨,，正在使用的定氮儀,，每次測樣前，蒸氣洗滌5min即可,。較長時間未使用的儀器,，重復蒸氣洗滌,，不得少于三次,，并檢查儀器是否正常,。仔細檢查各個連接處，保證不漏氣,。這樣，一方面保證了儀器的清潔,，另一方面,，也同時對儀器進行了檢查，一些壞的零部件,，可以及時被查出并替換。
定氮儀安裝完后,，我們需具體對儀器的內(nèi)部進行清潔,。首先在定氮儀蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水,，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性,，以避免水中的氨被蒸出而影響結(jié)果，并放入少許沸石（或毛細管等）,，以防爆沸,。這個步驟有點類似于凱氏定氮法的消化前步驟，用相應的試劑對其進行清洗,。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應室,，但玻杯內(nèi)的水不要放光，塞上棒狀玻塞，保持水封,，防止漏氣,。這一步可直接驗證插管是否可以使用。蒸氣發(fā)生后,，立即關閉廢液排放管上的開關,，使蒸氣只能進入反應室,，導致反應室內(nèi)的水迅速沸騰,，蒸出蒸氣由反應室上端口通過定氮球進入冷凝管冷卻,，在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水,。從定氮球發(fā)燙開始計時,，連續(xù)蒸煮5min，然后移開煤氣燈,。沖洗完畢,，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管，由于氣體冷卻壓力降低,，反應室內(nèi)廢液自動抽到反應室外殼中,，打開廢液排出口夾子放出廢液,。整個清洗過程，到這里就結(jié)束了,，經(jīng)過清洗這個過程,，定氮儀內(nèi)部環(huán)境已經(jīng)符合我們測定蛋白質(zhì)含量的需求,，另外,，定氮儀的各部件也得到了檢驗，可以及時更換漏氣或者其他壞了的部分,。根據(jù)以上步驟重復清洗2～3次,，再在冷凝管下?lián)Q放一個盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口*浸沒在溶液中，蒸餾1～2min,，觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色,。如不變色，表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈,。移去錐形瓶,，再蒸餾1～2min，用蒸餾水沖洗冷凝器下口,，關閉煤氣燈,，定氮儀即可供測樣品使用。
這樣,，凱氏定氮儀整個清洗過程就結(jié)束了,。凱氏定氮儀在測定蛋白質(zhì)含量前，一般都需要經(jīng)過清洗,，這樣對于測定結(jié)果,，會更加。另外,，也可以保證實驗室人員的安全,，因為在清洗過程中，對儀器進行了檢查,，排除了因為儀器的故障而造成了危險,。
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