分離細(xì)菌的方法很多，常用的有以下幾種。

　　將被檢材料接種于適宜培養(yǎng)基,，再于固體培養(yǎng)基表面生長的菌落中,，選樣欲分離菌的單個菌落，移種于另一適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng),。因?yàn)橐粋€菌落通常由一個細(xì)菌生長繁殖所形成,，故培養(yǎng)出的細(xì)菌是單一的種類，即純培養(yǎng),。

　　用特殊的培養(yǎng)環(huán)境(如厭氧,、二氧化碳環(huán)境等)分離細(xì)菌。

　　將被檢材料接種子易感動物體內(nèi),，使病原菌在動物體內(nèi)繁殖,，然后從動物體內(nèi)取材料利用離心機(jī)進(jìn)行離心分離出需要的成分后培養(yǎng)。利用某些細(xì)菌對一些理化因素有特殊抵抗力,，用理化方法處理接種材料,，殺死其他微生物而保存需要的細(xì)菌，再分離培養(yǎng),。

　　一般情況下,，被檢材料用前兩種方法分離培養(yǎng)即可。如披撿材料污染嚴(yán)重,，可先用后兩種方法處理,，再用前兩種方法獲得純培養(yǎng)。

　　在分離培養(yǎng)操作中,，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,。所有用具、培養(yǎng)基,、試劑都要經(jīng)過滅菌,，而且不能長時間暴露于空氣中。禁止用手接觸或用口吹已滅菌的器皿內(nèi)部,。

　　根據(jù)被檢材料中可能存在的病原苗的特性,，選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件：(溫度、氣體環(huán)境等),。進(jìn)行未知菌的初次分離，多用幾種培養(yǎng)基,，如肉湯,、鮮血瓊脂、麥康克瓊脂等,，每種培養(yǎng)基接種數(shù)管,，分別放在普通環(huán)境和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。一般經(jīng)過24—78小時觀察結(jié)果,，但也有一些病原菌,，需要培養(yǎng)校長時間才能生長,。　　

　　被檢材料一般不需要處理,，直接按種于培養(yǎng)基上,。當(dāng)懷疑為有芽腦的病原苗時，可將被檢材料加生理鹽水磨碎,，作成1：10乳劑(液體材料不必稀釋),，置60-80℃水浴中20—30分鐘，以殺死無芽胞的雜菌,，然后再接種于培養(yǎng)基中,。