色譜柱在使用前，進(jìn)行柱的性能測試,，并將結(jié)果保存起來,，作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品,、流動相,、柱溫等條件的差異而有所不同；另外,，在做柱性能測試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是*條件),，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性,。
色譜柱的平衡方法：
?。?）首先用0.2ml/min的流速將色譜柱平衡過夜，然后將流速升高到1.0ml/min沖洗30分鐘,，以便將色譜柱的填料充分平衡至*狀態(tài),，這樣可以保證色譜柱的使用壽命，并且保證在以后的使用中,，獲得分析結(jié)果的重現(xiàn)性,。
（2）平衡過程中,，將流速緩慢地提高,。
（3）用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑度如果較低,，則需要較長的時(shí)間來平衡),。
流動相的配制： 液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動相具備以下的特點(diǎn)：
?。?）流動相對樣品具有一定的溶解能力,，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時(shí)間保留在柱中),。
（2）流動相具有一定惰性,，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外),。
（3）流動相的黏度要盡量小,，以便在使用較長的分析柱時(shí)能得到好的分離效果,；同時(shí)降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動相的黏度),。
?。? ）流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。 如使用UV檢測器,，使用對紫外吸收較低的溶劑配制,。
（5）流動相沸點(diǎn)不要太低,，否則容易產(chǎn)生氣泡,，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。
?。?）在流動相配制好后,，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用,。
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