通常是在低滴度的病毒,。它用于貯存或進(jìn)一步的應(yīng)用,常常需要將其濃縮,。是一種快速,,簡(jiǎn)單,廉價(jià)的方法所需的,,集中病毒和去除雜質(zhì),。描述BioVision的PEG病毒降水工具包提供了一個(gè)簡(jiǎn)單,方便,,節(jié)省時(shí)間的方法,,集中病毒不超離心。該試劑盒可用于的小實(shí)驗(yàn)室樣品或大型的高產(chǎn)量和高病毒滴度的病毒制劑,。該試劑盒可用于集中在細(xì)胞培養(yǎng)基中或環(huán)境樣品的反轉(zhuǎn)錄病毒,,桿狀病毒,慢病毒,,和噬菌體等,。病毒可以集中超過(guò)100倍。
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備注:本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗(yàn)
產(chǎn)品名稱 :
Lentivirus concentration PL liquid
品牌 :
BIOMIGA
貨號(hào) :
V2001-01
規(guī)格 :
25ML
50ML
250ML
500ml
5L
詳細(xì)信息 :
簡(jiǎn)介:
通常是在低滴度的病毒,。它用于貯存或進(jìn)一步的應(yīng)用,,常常需要將其濃縮。是一種快速,,簡(jiǎn)單,廉價(jià)的方法所需的,,集中病毒和去除雜質(zhì),。描述BioVision的PEG病毒降水工具包提供了一個(gè)簡(jiǎn)單,,方便,,節(jié)省時(shí)間的方法,集中病毒不超離心。該試劑盒可用于的小實(shí)驗(yàn)室樣品或大型的高產(chǎn)量和高病毒滴度的病毒制劑,。該試劑盒可用于集中在細(xì)胞培養(yǎng)基中或環(huán)境樣品的反轉(zhuǎn)錄病毒,,桿狀病毒,,慢病毒,和噬菌體等,。病毒可以集中超過(guò)100倍。經(jīng)過(guò)優(yōu)化的病毒重新懸浮液提供zui大化病毒的
恢復(fù)40-100%取決于病毒的類型和來(lái)源,。整個(gè)交易過(guò)程采用無(wú)毒的試劑,。可用于濃縮的病毒感染,病毒DNA或RNA純化等
試劑儲(chǔ)存條件:
該解決方案是準(zhǔn)備使用和穩(wěn)定的12個(gè)月,在4℃或在-20℃下長(zhǎng)期貯存,。
協(xié)議:
步驟一:病毒生產(chǎn)
1感染的細(xì)胞,,并允許孵育,只要必要的接近zui大病毒生產(chǎn)的應(yīng)變和細(xì)胞類型的組合,。
2,,7分鐘,于1000rpm離心培養(yǎng),。
3,,重懸細(xì)胞沉淀在新鮮的培養(yǎng)基,。一個(gè)額外的48小時(shí)的孵育,。
4,離心機(jī)在14000rpm,,15分鐘,,以除去細(xì)胞文化。
5,,收集上清,,加入1倍體積的PEG溶液4倍體積的含有病毒上清。
6,放入冰箱冷藏過(guò)夜(穩(wěn)定在4°C)?2周,。
7,,2300RPM離心45分鐘,。
8,,除去上清液。
9,病毒顆粒重新懸浮在1/10到1/100的原始體積,。
10,,分裝在小樣品和存儲(chǔ)在-70°C使用,。
注:
A),。對(duì)于高滴度的病毒制劑,,再懸浮的體積應(yīng)限于至約3倍體積的白色沉淀,,通常為1/10?1/100的原始樣品的體積。如果不溶性物質(zhì)中存在的病毒懸浮液,,它可以通過(guò)離心除去在3,200 xg離心15分鐘,,在4℃。
的B),。避免凍結(jié)和解凍周期,,以zui大限度地提高病毒的恢復(fù)。
C),。痕量的病毒懸浮液中的PEG不會(huì)影響使用濃縮的病毒,。在某些情況下,,PEG可能會(huì)增加病毒感染效率,。但是,如果需要,,除去微量的PEG可以通過(guò)下面的過(guò)程:加入1倍體積的含有4 M氯化鉀和50mM的Tris-HCl,,pH7.2的(未提供)的溶液的濃縮的病毒懸浮液中的3倍體積的,。或者,,固體KCl添加到病毒懸浮液中,至終濃度為1 M.坐在冰15-30分鐘,。分拆在4℃下以12,000 xg離心10分鐘以除去沉淀物,。仔細(xì)收集病毒上清,。等分并存儲(chǔ)在-70℃下以供將來(lái)使用。