質(zhì)粒小量提取試劑盒

時(shí)間：2013-1-5閱讀：1458

英文名稱：Plasmid Miniprep Kit I

中文名稱 :質(zhì)粒小量提取試劑盒

編號: PD1211-01

規(guī)格: 50次

品牌：biomiga

佰易聚生物商城提供的分子生物學(xué)試劑和試劑盒,、美國聯(lián)合碳化和美國光譜醫(yī)學(xué)透析袋,、培養(yǎng)基和培養(yǎng)耗材,、細(xì)胞因子和細(xì)胞分離液、抗體和elisa試劑盒及常用生物試劑等,大量現(xiàn)貨火爆*,歡迎登錄www.ebioeasy.com或者,,，洽談選購,！

說明 :

從1~5mL 細(xì)菌培養(yǎng)液中純化提取10~30 ug 高純度質(zhì)粒DNA,。

試劑盒組分：

Catalog#	PD1211-01
Preps	50
ezBind Columns	50
Buffer A1	15 mL
Buffer B1	15 mL
Buffer N1	20 mL
Buffer KB	30 mL
DNA Wash Buffer*	15 mL
Elution Buffer	10 mL
RNase A （20 mg/mL）	1.5 mg（75 µL）
User Manual	1

保存條件：

RNAse A在4℃下可以保存一年,，Buffer A1加入RNase A 后4℃保存，其它組分室溫保存,。

注意事項(xiàng)：

使用前請將適量乙醇加入DNA Wash Buffer，令乙醇終濃度為80%
純化中低拷貝的質(zhì)粒時(shí),，使用2倍的菌液體積，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同體積的Wash Buffer和Elution Buffer
若為-70^oC甘油凍存的菌,，請先涂布平板培養(yǎng)后，再重新挑選新的單個(gè)菌落進(jìn)行培養(yǎng),。

操作簡要步驟：

接種新鮮的單個(gè)菌落到1-4 mL的LB培養(yǎng)基（含適量抗生素）,，37^oC震蕩培養(yǎng)14-16小時(shí)。室溫下10,000 x g離心1分鐘,，收集菌體,，并盡可能的吸去上清,。
加入250 µL Buffer A1（確保已加入RNase A）,，用移液槍或渦流震蕩充分懸浮細(xì)菌細(xì)胞。
加入 250 µL Buffer B1, 輕輕地反轉(zhuǎn)5-10 次以混合均勻，然后靜置2-5分鐘至溶液粘稠而澄清,。
加入350 µL Buffer N1, 立即反轉(zhuǎn)多次,，至溶液充分混勻，此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀,。
室溫下13,000 rpm離心10分鐘（若上清中有白色沉淀,，可再次離心）。
小心吸取離心后的上清液至帶有收集管的DNA柱中（避免吸起沉淀）,，室溫下13,000 rpm離心1分鐘,，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中,。
可選: 向DNA柱中加入 500 µL Buffer KB, 室溫下13,000 rpm 離心1分鐘,，倒掉收集管中的廢液，將離心柱重新放回到收集管中,。
向離心柱中加入650 µL DNA Wash Buffer（確保已加入無水乙醇）,，室溫下，13,000 rpm 離心1分鐘,，倒掉收集管中的廢液,，將離心柱重新放回到收集管中。重復(fù)步驟“8”,。
將離心柱放回高速離心機(jī)中,，13,000 rpm室溫下開蓋離心2分鐘，以*去除殘留的乙醇,。
將離心柱轉(zhuǎn)至一個(gè)新的1.5 mL離心管中,，向DNA柱的正中間加入50~100 µL（體積>50 µL）的ddH₂O（pH在7.0-8.5之間）或Elution Buffer，室溫放置2分鐘,，13,000 rpm 離心1分鐘,，洗脫質(zhì)粒DNA。將洗脫液再加入到柱中,，在13,000 rpm 離心1分鐘,，收集洗脫液。

操作流程：

質(zhì)粒小量提取試劑盒

會員登錄

收藏該商鋪

提示