透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室zui簡(jiǎn)便zui常用的分離純化技術(shù)之一,。在生物大分子的制備過(guò)程中，除鹽,、除少量有機(jī)溶劑,、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。透析只需要使用的半透膜即可完成,。通常是將半透膜制成袋狀,，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中,，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止,。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓,，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的,。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,，還正比于膜的面積和溫度,，通常是4℃透析，升高溫度可加快透析速度,。透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,，但用的zui多的還是用纖維素（再生纖維素RC、纖維素酯CE,、PVDF等）制成的透析膜,，目前常用的是美國(guó)美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司（spectrumlabs）和美國(guó)UnionCarbide（聯(lián)合碳化物公司）生產(chǎn)的各種尺寸的透析管,，截留分子量MwCO（即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的zui小分子量，縮寫為MwCO）大概有100-500,、500-1000,，1000、2000,、3500,、8000、10000,、15000,、20000、25000,、50000、100000,、250000,、500000、1000000等種類,，單位為道爾頓（D）,。商品透析袋制成管狀，其扁平寬度為8mm～77mm不等,。為防干裂,，出廠時(shí)都用10％的甘油處理過(guò)，并含有極微量的硫化物,、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),，它們對(duì)蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害，用前必須除去,。1.將透析管剪成適當(dāng)長(zhǎng)度（10-20cm）的小段,，即成透析袋。2.在大體積的2%（m/v)碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA(PH=8)中將透析袋煮沸10min,。3.將透析袋用蒸餾水*漂洗,。4.將透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min。5.透析袋冷卻后存放于4度,，應(yīng)確保透析袋始終浸沒(méi)在液體中,。注：從此步起用透析袋時(shí)一定要戴手套操作。6.在使用之前要用蒸餾水將透析袋里外加以清洗,。注：也可以將透析袋放在廣口瓶中充滿水,，松動(dòng)瓶蓋，于20psi（1.40kg/cm2)高壓滅菌10min,，代替第四步用1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min的操作,。新透析袋如不作如上的特殊處理,，則可用沸水煮五至十分鐘，再用蒸餾水洗凈,，即可使用,。美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的透析袋大部分是預(yù)處理過(guò)的，即用型,，使用前只需用蒸餾水沖洗即可使用,，spectra/por7系列和生物技術(shù)級(jí)的透析袋基本不含硫化物和重金屬離子。使用時(shí),，一端用橡皮筋或線繩扎緊,，也可以使用特制的透析袋夾夾緊，由另一端灌滿水,，用手指稍加壓,，檢查不漏，方可裝入待透析液,，通常要留三分之一至一半的空間,，以防透析過(guò)程中，透析的小分子量較大時(shí),，袋外的水和緩沖液過(guò)量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破,。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過(guò)ye時(shí)，體積增加50％是正常的,。為了加快透析速度,，除多次更換透析液外，還可使用磁子攪拌,。透析的容器要大一些,，可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶,。小量體積溶液的透析,，可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下,。檢查透析效果的方法是：用1％BaCl2檢查(NH4)2SO4,，用1％AgNO3檢查NaCl、KCl等,。為了提高透析效率,，還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設(shè)計(jì)與制作各種簡(jiǎn)易的透析裝置,。美國(guó)美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的各種型號(hào)的透析設(shè)備,，由于使用對(duì)流透析的原理，使透析速度和效率大大提高,。