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備注：本公司銷(xiāo)售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗(yàn)
產(chǎn)品名稱(chēng) :
Lentivirus concentration PL liquid
品牌 :
BIOMIGA
貨號(hào) :
V2001-01
規(guī)格 :
25ML
50ML
250ML
500ml
5L
詳細(xì)信息 :
簡(jiǎn)介：
通常是在低滴度的病毒,。它用于貯存或進(jìn)一步的應(yīng)用,，常常需要將其濃縮,。是一種快速,，簡(jiǎn)單,，廉價(jià)的方法所需的，集中病毒和去除雜質(zhì),。描述BioVision的PEG病毒降水工具包提供了一個(gè)簡(jiǎn)單，方便,，節(jié)省時(shí)間的方法,，集中病毒不超離心。該試劑盒可用于的小實(shí)驗(yàn)室樣品或大型的高產(chǎn)量和高病毒滴度的病毒制劑,。該試劑盒可用于集中在細(xì)胞培養(yǎng)基中或環(huán)境樣品的反轉(zhuǎn)錄病毒，桿狀病毒,，慢病毒,，和噬菌體等。病毒可以集中超過(guò)100倍,。經(jīng)過(guò)優(yōu)化的病毒重新懸浮液提供zui大化病毒的
恢復(fù)40-100％取決于病毒的類(lèi)型和來(lái)源,。整個(gè)交易過(guò)程采用無(wú)毒的試劑。可用于濃縮的病毒感染,，病毒DNA或RNA純化等
試劑儲(chǔ)存條件：
該解決方案是準(zhǔn)備使用和穩(wěn)定的12個(gè)月,，在4℃或在-20℃下長(zhǎng)期貯存。
協(xié)議：
步驟一：病毒生產(chǎn)
1感染的細(xì)胞,，并允許孵育,，只要必要的接近zui大病毒生產(chǎn)的應(yīng)變和細(xì)胞類(lèi)型的組合。
2,，7分鐘,，于1000rpm離心培養(yǎng)。
3，重懸細(xì)胞沉淀在新鮮的培養(yǎng)基,。一個(gè)額外的48小時(shí)的孵育。
4,，離心機(jī)在14000rpm，15分鐘,，以除去細(xì)胞文化,。
5，收集上清,，加入1倍體積的PEG溶液4倍體積的含有病毒上清,。
6,，放入冰箱冷藏過(guò)夜（穩(wěn)定在4°C）?2周。
7，2300RPM離心45分鐘,。
8,，除去上清液,。
9,，病毒顆粒重新懸浮在1/10到1/100的原始體積。
10，分裝在小樣品和存儲(chǔ)在-70°C使用,。
注：
A）。對(duì)于高滴度的病毒制劑,，再懸浮的體積應(yīng)限于至約3倍體積的白色沉淀,，通常為1/10?1/100的原始樣品的體積,。如果不溶性物質(zhì)中存在的病毒懸浮液，它可以通過(guò)離心除去在3,200 xg離心15分鐘,，在4℃,。
的B）,。避免凍結(jié)和解凍周期,，以zui大限度地提高病毒的恢復(fù),。
C）,。痕量的病毒懸浮液中的PEG不會(huì)影響使用濃縮的病毒。在某些情況下，PEG可能會(huì)增加病毒感染效率,。但是,，如果需要，除去微量的PEG可以通過(guò)下面的過(guò)程：加入1倍體積的含有4 M氯化鉀和50mM的Tris-HCl,，pH7.2的（未提供）的溶液的濃縮的病毒懸浮液中的3倍體積的。或者,，固體KCl添加到病毒懸浮液中,，至終濃度為1 M.坐在冰15-30分鐘。分拆在4℃下以12,000 xg離心10分鐘以除去沉淀物,。仔細(xì)收集病毒上清,。等分并存儲(chǔ)在-70℃下以供將來(lái)使用,。
