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各種動物外周血和臟器組織NK細胞分離試劑盒操作說明：

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試劑盒內(nèi)容

試劑：全血及組織勻漿稀釋液 200ml

試劑：細胞洗滌液 200ml

試劑B： 200ml

試劑D： 200ml

試劑E： 200ml

說明書 1份

操作方法（操作全過程應在20-25度環(huán)境下進行）

1. 取 1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液（或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細胞 1X107/ml）1：1混合后再按2:1的比例與E液混合,，20℃-25℃靜置3分鐘，吸取上層渾濁液,，棄去大部分紅細胞,。在10ml或15ml玻璃離心管中依次小心加入B、D兩種液體各1ml,制成梯度界面（液面分層一定清晰）,。將吸取的上層渾濁液疊加于D液之液面上,，以400g（約1500轉/分）離心15分鐘（半徑15cm水平轉子），渾濁液與D液間的界面為NK細胞層.（提取率約為80%）,。

2.  吸出NK細胞層以細胞洗滌液洗滌三次備用,。細胞放入含細胞洗滌液（Cat#2010X1118）4-5毫升的試管中，充分混勻后,，以500g（約1800轉/分）離心20分鐘,。沉淀經(jīng)反復洗2次即得所需細胞。

分離圖例：

注意

TBD 實驗室的細胞分離培養(yǎng)基是敏光型的,。這種培養(yǎng)基在運輸和貯藏過程中應避光保溫,。由于各品牌離心機的性能不同，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,，可能影響分離效果,，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉數(shù)，調(diào)節(jié)離心的時間,，摸索*的分離條件（具體分離條件各實驗室自定）,。組織，血液,，細胞要求新鮮,，避免冷凍和冷藏。

貯藏

18-25℃避光保存,。啟封后置4℃保存,。本品為真空包裝，未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結晶,，影響分離效果,。

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