Q1：關(guān)于膜表面積和樣品量之間的關(guān)系有沒有經(jīng)驗(yàn)法則,？

表面積與體積的比值取決于膜管扁平寬度。如果有兩段相同長(zhǎng)度的膜管,，扁平寬度較小的膜管具有較高的比表面積,，而扁平寬度較大的膜管比表面積相對(duì)較小，也就是說,，前者的透析速率更快,。原因是扁平寬度較小的膜管，溶質(zhì)的擴(kuò)散距離較短,，溶質(zhì)之間通過膜孔的競(jìng)爭(zhēng)也較小,。而扁平寬度大，亦即溶質(zhì)到達(dá)膜表面的距離也較長(zhǎng),，溶質(zhì)之間對(duì)膜孔的競(jìng)爭(zhēng)也較大,。一般而言，比表面積越大,，透析越快,。

Q2：如果膜兩側(cè)的摩爾滲透壓濃度相等，但濃度梯度仍然存在,，物質(zhì)的通過效率如何,？

大多數(shù)透析結(jié)束時(shí)膜兩側(cè)滲透壓相同。透析過程是由膜管內(nèi)外兩側(cè)的濃度梯度驅(qū)動(dòng)的,。如果滲透壓力有很大的差別,，水會(huì)通過膜以平衡膜兩側(cè)的滲透壓。如果過多的水通過膜,，透析膜管可能會(huì)隨水運(yùn)動(dòng)的方向增大或縮小,，在體積增加到一定程度時(shí)，有可能導(dǎo)致膜夾松動(dòng)或膜管破裂,。

Q3：進(jìn)行超濾時(shí),，透析膜能承受多大的壓力？

透析膜設(shè)計(jì)不適合用于壓力過濾,。在不影響截留分子量的前提下,，zui大推薦壓力為1.5 psi。

Q4：一般推薦使用哪種透析液（緩沖液）,？

生物分子必須保存在嚴(yán)格的pH值控制條件下,，以穩(wěn)定其分子極性。典型的透析緩沖液pH范圍為6-8,。以下為常用的幾種可以作為緩沖液的生化溶液：

• 水
• PBS
• TBS
• HEPES
• 氨基酸緩沖液

Q5：為什么使用微米vs道爾頓（MW）單位,，怎么轉(zhuǎn)換？

溶解的分子大小以分子量來定義,，單位為道爾頓,，而顆粒和細(xì)胞大小常以直徑來定義,，由于分子的結(jié)構(gòu)和形態(tài)不同，相同分子量的物質(zhì),，分子大小和形態(tài)可能相差較大,，兩者之間沒有的對(duì)應(yīng)關(guān)系。出于這個(gè)原因,，許多常見的生物材料都已特別定性,，并將大約的尺寸標(biāo)注在轉(zhuǎn)換表上作為估算的參考，以用于透析,、超濾和微濾應(yīng)用,。道爾頓與微米單位之間的轉(zhuǎn)化見圖。

Q6：對(duì)于鹽濃度較高的樣品,，*的透析方法是什么,？

如果可能，我們推薦使用低鹽濃度的緩沖液,。不推薦直接使用純DI水作為緩沖液,，因?yàn)闈B透壓力可能將水引入膜管，使樣品體積膨脹并可能導(dǎo)致膜管破裂,。使用一系列濃度逐漸降低的溶液作為緩沖液可防止?jié)B透壓力導(dǎo)致的膜管膨脹,。每次緩沖液置換，可將溶質(zhì)濃度降低十分之一,，也就是說,，透析一個(gè)5M NaCl的樣品，可使用500 mM NaCl的緩沖液,。

Q7：可以使用繩子結(jié)扎膜管,，而不使用膜夾嗎？

我們不推薦使用繩子結(jié)扎膜管,。因?yàn)槔K結(jié)對(duì)膜管的損害具有很大的不確定性,，并且可能不能提供有效的密封，而導(dǎo)致泄露,。只有膜夾才能提供足夠的密封性，從而保護(hù)樣品,。

Q8：透析膜管應(yīng)該剪多長(zhǎng),？

對(duì)于每種膜管扁平寬度，spectrumlabs提供相關(guān)的容積/長(zhǎng)度比,，可方便計(jì)算透析樣品所需的膜管長(zhǎng)度,。如果扁平寬度為16 mm，容積/長(zhǎng)度比為0.79 ml/cm,，要容納5 ml的樣品,，則需要大約6.5 cm長(zhǎng)的膜管。但是，為保持樣品漂浮,，一般需要在頂部空間預(yù)留10-20%膜長(zhǎng)（約為1 cm）,。此外，也需在兩端為膜夾各預(yù)留2 cm,。所以總的膜管長(zhǎng)度應(yīng)至少為11.5 cm,。

可根據(jù)以下公式計(jì)算膜管長(zhǎng)度：

總長(zhǎng)度=（樣品體積）/（容積/長(zhǎng)度）+（額外的10-20%）+4 cm

根據(jù)樣品體積和扁平寬度，計(jì)算所需的膜管長(zhǎng)度,。