本產(chǎn)品僅用于科研,，不用于臨床

人骨保護(hù)素（OPG）ELISA試劑盒小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白（E-Cad）ELISA試劑盒 Human Osteoprotegerin，OPG ELISA Kit Y0036196T/48T

人骨成型蛋白2（BMP-2）ELISA試劑盒Human Bone morphogenetic protein 2,，BMP-2 ELISA KitY0036296T/48T

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以下是公司小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白（E-Cad）ELISA試劑盒 的簡易說明書：
使用目的：本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量,。
實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平,。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原,，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),，再與HRP標(biāo)記的抗原抗體結(jié)合,，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的,。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物質(zhì)的濃度,。
試劑盒組成

標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗,。若不能馬上進(jìn)行試驗,，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1）標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。

2）加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
3）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4）配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干。
6）加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。
7）溫育：操作同3,。
8）洗滌：操作同5,。
9）顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.
10）終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)）,。
11）測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié)：

計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。
注意事項：
（1）試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
（2）濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
（3）各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
（4）請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
（5）封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
（6）底物請避光保存。
（7）嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
（8）所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
（9）本試劑不同批號組分不得混用,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個月

 人環(huán)磷酸腺苷（cAMP）ELISA試劑盒Human cyclic adenosine monophosphate,，cAMP ELISA KitY0036396T/48T

人乳酸脫氫酶（LDH）ELISA試劑盒 Human Lactate Dehydrogenase，LDH ELISA Kit Y0036496T/48T

人抑肽酶（AP）ELISA試劑盒Human Aprotinin,，AP ELISA KitY0036596T/48T