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牛C反應 (CRP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

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牛C反應 (CRP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用,。

檢測范圍:96T

35µg/L -1000µg/L


使用目的:

本試劑盒用于測定牛血清,、血漿及相關液體樣本中 C反應(CRP)含量,。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛 C  反應(CRP)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入  C  反應白(CRP),,再與 HRP標記的  C反應    (CRP)抗體    ,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,。TMB在   HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的  C 反應    (CRP)呈正相關,。用酶標儀(CRP)    ,。用純化的牛 C  反應在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中牛   C反應

(CRP)濃度,。


試劑盒組成

1.png


標本要

1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,,因   NaN3抑制辣根過(HRP)活性,。


牛C反應 (CRP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟

1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。2.png

2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,,然后再待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。

3.溫育:用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。

4.配液:將 30倍濃30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜30秒后棄去,,如此重復 5次,,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,,空白孔除外,。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5,。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液    50µl,,終止反應(此時藍色立轉)。

11.測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行。


操作程序總:


333.JPG



計算
以標準物的濃度為橫坐標,, OD值為縱坐標,,在坐標紙上,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度,。


牛C反應 (CRP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存,。

2.濃洗滌液可能會有析出,,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響,。

3.各步加樣均應使用加樣器,,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間

控制在 5分鐘內,如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。

4.請每次測定的同時做標準曲線。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值大于標準品孔di一孔的 OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉,。

6.底物請避光保存,。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗.

8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。

9.本試劑不同批號組分不得混用。


保存條件及有效期

1.試劑盒保存:2-8℃,。

2.有效期:6個月

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